Structura antigenic - rubeolei

Video: Klebsiella

Video: Baksheeva SS Antigenele. anticorpi

După cum sa menționat în secțiunea „Caracterizarea virionului“, în culturi celulare infectate cu virusul rujeolei, determinat de particule virale infecțioase, având ambele n și COP-activitate (antigenele V așa-numitele), și „solubil“ antigen ( «S»), cu numai activitatea COP. Mai mult, folosind tehnica imunodifuzia pot identifica două sau trei antigen precipitant. De asemenea este descrisă un antigen detectabil în reacția agregării plachetare (PAT) (Vaheri, Vesikari, 1971). antigenului specific virusul rubeolei poate fi detectat, de asemenea, prin imunofluorescență (Brown e. A., 1964).
Până în prezent, cu ajutorul unor tehnici disponibile nu au putut detecta orice diferențe antigenice semnificative între tulpinile de virus rubeolic din diverse surse. Putem presupune că virusul rubeolei, cum ar fi virusul rujeolei în sălbăticie se găsește sub forma unui singur serotip.
Să ne locui pe descrierea KS și antigenul HA, deoarece aceste antigene sunt cele mai importante în practica studierii infecției cauzate de virusul rubeolei.
Complement de fixare a antigenului. celule infectate antigen Culturile KS este detectat în formă de virion asociate cu V-antigen cu densitate flotabil în gradient de zaharoză egal 1,19-1,21 g / cm3 și un antigen „solubil“, care are o densitate Infloritoarea 1,08- 1,11 g / cm3 (Schmidt, Lennet, 1969).
virusul rubeolei Activitatea CS a fost descoperit Sever et al. (1965), atunci când sunt cultivate în culturi primare de celule de rinichi de maimuță verde și Rk13. unități antigen 4-8 titruri au fost detectate în 30% din suspensia de celule, concentrat de 200 de ori pe zi, 2-3 după infectare. Pentru antigenul utilizat și alte culturi celulare: LLC-MK2, GMK.-AH-1, Vero. Final supernatantul culturii celulare, folosind o concentrație de antigen poate fi obținut în titrele 8-64 unități. VV Chebotarev Oganesyan și O. T. (1970) a dat antigenul COP prin congelare și decongelare de trei ori culturi de celule de rinichi de maimuță verde infectate cu virusul rujeolei. Autorii au folosit următoarele prin extracție cu expunerea la ultrasunete timp de 15 minute pentru a da un titru foarte mare de antigen (Chebotarev VV, VP Moses, 1971).
Bună cultură pentru COP-antigen au fost BHK21 celule, care au fost utilizate în monostrat sau în culturi în suspensie (Halonen e. A., 1967a). Titrurile maxime de antigen au fost obținute prin placarea celulelor infectate cu virus la o multitudine de 0,01-1 per celulă.
antigen KS fără o reducere substanțială a titrului menținut timp de 12 luni la o temperatură de 4 ° - încălzire la 56 ° inactivează antigen pentru ore- la -70 ° antigen poate fi depozitat timp de mai mulți ani. Tratamentul cu formalină (1: 2000) sau razele UV, distrugerea infectivitatea nu reduce titrul de antigen.
Hemoglutinanți antigen. antigen HA este mai întâi obținut de Stewart și colab., în 1967. Înainte de acest eșec în producția de antigen s-au datorat faptului că serul animal adăugat la lichidul de cultură care conține substanțele care inhibă virusul rubeolei hemaglutinare. In mai multe studii recente au descoperit ca inhibitor stabil termic al hemaglutinare este p-lipoprotein (Chang, Weinstein, 1972), care pot fi eliminate din
serica utilizând procesarea corespunzătoare. Stewart și colab. (1967) a folosit un mediu conținând ser bovin fetal, caolin tratat. In loc de caolin tratate cu ser, poate fi utilizat de asemenea bovine albumina. Un alt punct esențial în prepararea antigenului HA este utilizarea unei multitudini mare de infectare (0.5-1.0 per celulă), care duce la proliferarea intensă și proliferarea titrurile de virus.
utilizarea culturilor în suspensie au dovedit foarte eficiente. Aceasta permite cantități mari de antigen. Stewart și colab. (1967) au primit antigen de pe celule BHK21, care sunt în continuare cele mai potrivite pentru cultura preparatelor de antigen, cu toate că în acest scop sunt folosite și de alte sisteme de celule.
Un pas important în prepararea antigenului HA este tratamentul de material care conține virusul Tween-80 și eter Norrby (1962), care a avut ca rezultat titruri au crescut semnificativ, S dobândește în plus antigen termostabilitate.
Halonen și colab., (1967b) a încercat să obțină titruri mari de antigen-HA, extragerea virusului din suspensia de celule prin tratament timp de 30 de ore la 35 ° soluție alcalină tamponată (pH 9,0) și apoi sonicate timp de 30-60 min.
In laboratorul nostru Desyatskova RG (RG Desyatskova, EF Opochinsky, 1973) au primit antigen HA folosind cultură monostrat 13S BHK21 celule și tulpina Sp-2 virusul rubeolei, adaptată la cultura (Furukawa e. a., 1967). Factori substanțiale în obținerea aplicării antigen au fost multiplicitate mare de infecție, utilizarea de susținere mediu ser de vițel, caolin tratat, și tratamentul cu Tween-80 și eter. Titrul virusului în lichidul de cultură înainte de tratament a fost unitatea 8- 64 după prelucrarea în titrurile de antigen au crescut 4-32 ori.
virusul rubeolei aglutinează celule roșii din sânge de mai multe specii de pasari si porumbei mlekopitayuschih-, pui, gâște, curcani, prepelițe japoneze, șobolani, iepuri, oi, porci, câini, pisici, maimuțe și oameni cu grup sangvin O (EA Kulish și colab. 1973- Schmidt e. a., 1971).
Conform datelor recente, tratamentul cu tripsină al eritrocitelor conduce la o creștere de 2-4 ori a sensibilității la virusul rubeolei acțiune eritrocitare hemaglutinare (E. A. Kulish și colab., 1973). Cercetătorii cred că acest lucru se datorează distrugerii inhibitorilor de aglutinare a naturii proteinelor, localizate pe suprafata celulelor roșii din sânge, ceea ce duce la demascarea receptorilor eritrocit neproteice ascunse.
Hemaglutinina în preparate native din virusul rubeolei este foarte termolabilen- procesarea Tween 80 și eter crește dramatic rezistența la antigen. La o temperatură de -20-70 ° antigen prelucrat poate persista ani.

Video: Despre pielea umană