Ideile moderne despre rolul anticorpilor la colagen - lupus eritematos sistemic, scleroza sistemică, artrita reumatoidă

CAPITOLUL I
ideile moderne despre rolul de anticorpi la colagen în dezvoltarea lupus eritematos sistemic, scleroza sistemica si artrita reumatoida
Colagenul este o componentă majoră a țesutului conjunctiv, este mai mult de 30% din greutatea totală a proteinei corpului uman, și aproximativ 40% din ea este în piele, aproximativ 50% - țesuturi scheletic și 10% - în stroma organelor interne.
In marea majoritate a tesutului colagen este compus din fibre de colagen. În ultimii ani, a acumulat o cantitate semnificativă de informații cu privire la structura, specificitatea și metabolismul colagenului. Dacă în 1987 a fost de 12 tipuri cunoscute de colagen, dar astăzi este studiat pentru 16 tipuri.
molecula de colagen individuale se compune din trei lanțuri polipeptidice spiralized, numite alfa-lanțuri, care sunt răsucite împreună într-o spirală comună și stabilizate prin legături de hidrogen. molecula de colagen are o greutate moleculară relativă de 300.000 daltoni, o lungime de 280 nm și o grosime de 1,4 nm. Fiecare lanț alfa conține o medie de aproximativ 1000 de resturi de aminoacizi. Caracteristica distinctivă este prezența hidroxiprolinei colagenului și hidroxilizina (markeri chimici de colagen), lipsa de triptofan, tirozină scăzută și metionină, un conținut ridicat de glicină (aminoacizi aproximativ o treime) și prolina și hidroxiprolina (trimestru). Porțiunile de capăt ale lanțurilor alfa asupra N- și C-terminale ale moleculei (telopeptides) sunt diferite de partea principală a compoziției de aminoacizi. Ele nu conțin nici o prolina și hidroxiprolina, au glicină în fiecare poziție a treia, și, prin urmare, nu formează un triplu helix. porțiuni Nonspiral atașați un rol deosebit în mecanismul de polimerizare a moleculelor în fibrilară, formarea de reticulare intermoleculare în proprietățile antigenice ale colagenului (Piez K. A.,] 976). Cea mai importantă realizare din ultimii ani este descoperirea de eterogenitate de colagen. Din diferite țesuturi izolate 16 tipuri distincte genetic de colagen. Acestea diferă în combinația de cinci lanțuri triple catenar molecula alfa, care sunt codificate de gene diferite și au unele caracteristici ale structurii primare (Gay S., Miller T.G., 1978), sinteza fiecărui locilor genetic cu lanț alfa determinat.
Colagenul este sintetizat în principal în fibroblaste și varietățile lor locale. Conform datelor recente, membrana de colagen subsol produs ca celulele endoteliale și epiteliale (Chang, E., 1976, Jaffe EA, 1976). Colagenul se găsește și în cultura mioblastelor (LiptonB.H., 1977).
Studiile imunohistologice au arătat că se poate sintetiza fibroblaste și de tip I și III de colagen. Procolagen colagen intră inițial intracelulară de către proteaze specifice extracellularly apoi (Miller F. I., 1978). Procolagen diferă de colagen prin reacția cu anticorpi specifici (Novak N., 1976).
Diferențele imunologici între diferitele tipuri de colagen au permis în ultimii ani, datorită metodelor immunomorphological folosind anticorpi specifici de tip pentru a studia localizarea diferitelor tipuri de colagen în structurile de țesut conjunctiv.
Colagenul de tip I este conținută în principal în oase, ligamente, capsula articulara. Pielea conține, de preferință de tip colagen uman I (Epstein E, N. și colab., 1975), în cantități substanțiale, este de asemenea parte a țesutului conjunctiv alveolelor pulmonare, pereților vasculari, intestine pereți. Compozitia de ficat, plămân, rinichi si splina include colagen de tip I în combinație cu colagen de tip III (Lapiere S. M. et a!., 1976- Steffen, S., 1990). Cuplarea cartilajului țesut constă în principal dintr-o combinație de tipuri de colagen 1 și II. Membrana sinovială include colagen de tip I și tip III de colagen este mai mică sau colagen de tip I și III, în cantități echivalente (Eyre R, ETAL., 1975).
Stofe (inclusiv imunitar) specificitatea de colagen, par să joace un rol în patologia. Este posibil ca specificitatea imun al diferitelor tipuri de colagen determină în mare măsură procesul de localizare predominantă în bolile sistemice ale țesutului conjunctiv: piele sclerodermia, articulațiilor în poliartrita reumatoidă. Există dovezi de o schimbare a tipurilor de colagen în termeni de patologie (Serov VV, 1981)
Sa constatat că, în pielea de embrioni umani predominant de colagen de tip III, neonatal este de 30%, iar ulterior înlocuit în principal de colagen tip I (Epstein E. N. și colab., 1975). Țesutul de granulație la adulți, de asemenea, primul tip de colagen predominant III, fiind înlocuit ca maturarea în colagen I tip. În acest caz, cheloide, care se caracterizează prin elemente celulare imature rămâne conținut ridicat de colagen de tip III. Este de remarcat, de asemenea că acumularea de colagen în artrita reumatoidă, sclerodermia, diverse inflamații cronice, fibroza pulmonară, ciroză hepatică (Wick G. și colab., 1978).
Sclerodermia sistemica este caracterizata prin fibroza pielii și a organelor interne, ceea ce se explică prin creșterea țesutului conjunctiv. Astfel, potrivit de Crombrugghe B. și colab., 1990 a remarcat o creștere a conținutului de colagen din piele de tip I și III. . Perlish J. S, și colab, 1988, notează că raportul dintre colagen I și II, tipic de piele sanatoasa nu este rupt în sclerodermia, dar își schimbă distribuția acesteia: conținutul de colagen de tip III este crescută în straturile medii și profunde și colagen I tip numai în straturile profunde ale dermei (Majewski S. și colab., 1992). In miocardului ventricular pacientilor cu sclerodermie sistemica a relevat conținutul de colagen de tip 1 a crescut la 41% (Chapman D. și colab., 1990), sinteza colagenului de tip I este de asemenea, crescute în labiale țesuturile glandelor salivare ale pacienților cu scleroză sistemică (Janin A. și colab., 1990) .
In lupus eritematos sistemic, însoțite de leziuni cutanate au evidențiat o fragmentare a colagenului, în special, este o parte a membranei bazale.

Modificarea raportului dintre tipurile I și II de colagen este de asemenea găsit în placa aterosclerotică, cu osteogeneză imperfectă, osteoartrita și alte boli. Embrionare cartilaj sintetizat tipurile I și II de colagen și în tip adult colagen rămâne doar în pericondrul în țesutul osos are loc procesul invers (Seyer J. M., Vinson W, S., 1974).
Problema schimbarea mecanismelor de sinteză a colagenul nu au fost încă pe deplin rezolvate. Există două posibilități: o modificare a conținutului cantitativ al țesutului populațiilor de celule care produc un anumit tip de colagen, și / sau de comutare de sinteză în celulele în timpul diferențierii lor prin factorii de reglementare represiune sau depresie corespunzătoare genei (IAPM R. et al, 1976, 1977.). În raportul scleroderma sistemică variază între substanță celulară și intercelulare în favoarea celor din urmă (Majewski S. et al., 1992), ceea ce indică faptul că creșterea sintezei de colagen de fibroblaști. O astfel de hipersecreție se datorează creșterea expresiei genei de colagen. Există dovezi de creștere a exprimării genei de colagen de tip I la pacienții cu piele sclerodermia de 3 ori comparativ cu grupul de control (Herrman N. și colab ,, 1991- Varga J. și colab., 1990). Herrman H. și colab., 1991, indică modificări avantajoase în nivelul genei colagenului de tip I in scleroza sistemica.
Studiile timpurii ale colagenului ca antigen folosind colagen insolubil a condus la hotărârea că colagenul și gelatina (colagen denaturat) nu sunt antigene. In experimentele cu iepuri prin imunizare cu colagen solubil acid obținut din tendoane iepuri, sa dovedit că colagenul solubil este imunogen și induce un răspuns imun cu formarea de anticorpi specifici (Rothbard S. și colab., 1965). In alte studii, sa demonstrat că colagenului din formularea reacționează cu anticorpi la colagen și anticorpi prezenți în serul pacienților cu artrită reumatoidă (Steffen, S., 1980).
Literatura de specialitate a descris imunogenitatea colagen solubil în acid și denaturat slab cu anticorpi la colagen cu specii strict specificitatea și un grad ridicat de sensibilitate interspecii la vertebrat uman (Timpl R. și colab., 1968).
Studiile imunologice au arătat prezența moleculelor de colagen a trei grupe diferite de determinanți antigenici (Timpl R., 1976). Mouse-ul anticorpilor pentru colagenul de tip I bovin reacționează cu determinanții într-o regiune elicoidală terțiară, adică cu lanțuri dependentă de structura de cuplare [alfa-1 {|), 2 alfa]. Anticorpii de iepure a colagenului de tip I nativ reacționează cu diferite tipuri de factori determinanți asupra regiunilor terminale ale lanțurilor (Lindsley N. și colab., 1971). anticorp șobolan la colagen de tip I reacționează cu determinanții de pe supercoiling și nu reacționează cu lanțul alfa izolat (Hahn F. și colab., 1974). Se constată că procesul de formare a anticorpilor, ca răspuns la colagen este thimic-independent (Selam. Etal., 1972).
Colagenul este un autoantigen. Dovadă sunt numeroasele experimente cu artrită indusă de colagen. In 28% din șoareci după administrarea de colagen II omoloage dezvoltat artrită tip clinic și histologic similar cu artrita reumatoida la om, ele au, de asemenea, în mod frecvent detectate in factorul reumatoid din sange, anticorpi antinucleari si anticorpi pentru colagenul de tip II (Bouvet G.-P. și colab ,, 1990). Există rapoarte ale dezvoltării artritei autoimune la iepuri ca răspuns la colagen de tip II autolog (Trentham D. F. și colab., 1978). In experimente folosind tip II artrita colagen a fost utilizat pentru colagen idduktsii tratat cu pepsină, și, prin urmare, sugerează că determinanții antigenici responsabile pentru răspunsul imun, sunt aranjate în zona terminalului și sunt eliberate sub acțiunea colagenazei în colagen nativ (Steffen S. , 1980).
fibrile de colagen în condiții fiziologice (pH neutru, temperatura sub 37 ° C) Stabilitate la exopeptidaze (tripsină, pepsină, papaină) și nelizosomalnyh lizozomale celulare și endopeptidaze capabile să distrugă numai colagen denaturat (Weiss J. V., 1976). Pentru o lungă perioadă de timp nu am putut găsi enzime colagenolitice specifice ale organismului. In prezent enzime colagenolitice izolate din mai multe tesuturi: piele, cartilaj, cornee, gingivale, sinoviala, stomac, rinichi, uter, ficat. Acestea se găsesc în celulele epiteliale ale ficatului, gingiilor si a epidermei, dar mai ales în celulele mezenchimale: leucocite polimorfonucleare, eozinofile, macrofage, fibroblaste, osteoblaste, sinoviocite. Colagenaza este de asemenea găsit în trombocite (Harpes E. și colab., 1975). Activitatea Kollagnoliticheskaya este crescută în condiții patologice: în tumorile, vindecarea rănilor, inflamație. Activitatea Kollagneaznaya a fost observat în fluidul sinovial obținut din articulațiilor genunchiului ale pacienților cu artrită reumatoidă. Astfel, colagenaza sinoviale produsă de celulele sinovialei și colagenaza, este eliberat din garnulotsitov lichidul sinovial, poate fi responsabil pentru producerea de colagen imunogenă. Colagenaza introdus în cavitatea articulației genunchiului iepure, determină dezvoltarea artritei (Steffen S. et al., 1979).
In scleroderma remarcat colagenoliză insuficiente, ceea ce poate duce la fibroza nu mai puțin decât creșterea sintezei de colagen (Peres-Tamajo R., 1978).
Un număr mare de lucrări consacrate reglementării colagenoliză. A stabilit că colagenazei este produsă într-o formă inactivă zimogen (prokollagenazy), care se caracterizează prin faptul că „exces“ peptidă. activare enzimatică are loc prin proteoliză limitată, adică scindarea moleculei sub influența enzimelor lizozomale sau peptidaze neutre. Mai mult, sa constatat că activitatea colagenazei este inhibată lângă factorii serici, printre care rolul principal este jucat de alfa-2-macroglobulina. Colagenoliză reglementate, aparent o combinație a următoarelor trei mecanisme: stimularea sintezei colagenazei în celulele hormoni, prostaglandine, factori sintetizate de celulele mastocite, limfocite, activarea epiteliem- inhibării prokollagenazy- a activității colagenazei (Gross J., 1977).
Ea deține specificitatea de substrat a colagenazei. Sensibilitate la colagen tip I colagenaze din toate sursele este de 5 ori mai mare decât cel al colagenului tip II. leucocitele polimorfonucleare Colagenaza semnificativ mai puternic (de 15 ori) acționează asupra colagenului de tip I decât tipul III de colagen și colagenaza în fibroblaștilor și selectivitate de macrofage este absentă (Weiss J. V., 1976). Aceste date sugerează că nu numai sinteza, ci și proteoliza de colagen de celule diferite pot juca un rol în reglarea unei compoziții tipice de colagen in inflamatie si fibroza de dezvoltare.
Colagenul are domenii la fracțiunea de complement Clq. Sub acțiunea colagenazei a membranelor sinoviale în artrita reumatoidă, moleculele de colagen sunt distruse site-ul responsabil pentru legarea complementului Clq (Mensel E. J. și colab&bdquo- 1978).
Rolul colagenaze si anticorpi la colagen în bolile țesutului conjunctiv difuze puțin înțelese. Cel mai mare număr de studii dedicate artritei reumatoide. În experimentul cu introducerea în cavitatea genunchiului iepure artrita articulatiilor colagenaza dezvoltat in termen de 18 ore după injectare. In cultura prokollagenazy reumatoide în țesutul sinovial marcat activarea granulocitelor. Activitatea prokollagenazy este crescută în lichidul sinovial reumatoid (Okada Y., 1990).
Astfel, activarea colagenazei în cavitatea articulației genunchiului poate servi drept una dintre cauzele de eliberare a colagenului imunogen, capabile de a provoca formarea de autoanticorpi. Un număr mare de studii consacrate identificării autoanticorpilor la colagen în serul pacienților cu artrită reumatoidă. Aceste studii se referă la anticorpi pentru a colagenului de tip II.
Anticorpi a colagenului de tip II la pacienți cu poliartrită reumatoidă se găsesc într-un procent mare de cazuri decât la martori sănătoși (Fujii K. et al., 1992- Boisser M. S. Etal ,, 1991). Prin imunoenzimatice la 22,7% dintre pacienții cu artrită reumatoidă au gasit anticorpi nativ colagen tip II și au sensibilitate să traverseze colageni tip I și III. Potrivit Jeng K. S. și colab., 1990, anticorpii pentru colagenul de tip II a fost detectat la 19% dintre pacienții cu artrită reumatoidă,
Semnificativ mai puțin în datele din literatura de specialitate privind nivelul de anticorpi a colagenului de tip I la pacienții cu artrită reumatoidă, ca o consecință, munca a fost intreprinse pentru a studia acest parametru. Nivelul de anticorpi la colagen de tip I, definit la pacienții cu artrită reumatoidă a fost semnificativ mai mare decât grupul de control (p<0,005). Как видно из табл. 1, титр антител к коллагену I типа увеличивается с возрастанием степени активности процесса (М. X. Таова). При этом уже в группе с минимальной степенью активности он превышает нормальные показатели (р<0,05). Титры антител к коллагену I типа достоверно различаются между собой в группах с различной степенью активности ревматоидного процесса (р<0,05) (рис.1). Выявлена линейная корреляционная зависимость между степенью активности ревматоидного артрита и титром антител к коллагену I типа (г=+0,69- р<0,001), что позволяет говорить о важной их роли в патогенезе ревматоидного артрита.
Ralky L. G. și colab .... 1991 a aratat niveluri ridicate de anticorpi pentru a colagenului de tip I la șoareci cu artrită spontană. Faptul că la pacienții cu artrită cronică juvenilă și artrita reumatoidă au crescut titrurilor de anticorpi la colagen de tip I, în comparație cu titrul de anticorpi pentru colagenul de tip II și III notează Svobodora J. et al .... 1989.

Anticorpii la colagen în alte boli ale țesutului conjunctiv difuze, deși datele din literatură limitate și inconsecvente, anticorpi la colagen găsit în membrana bazală a pielii la forma buloasa dermic de lupus eritematos sistemic (Woodley R. T. și colab., 1991). Anticorpi kkollagenu tipurile I și II identificate la 35% dintre pacienții cu lupus eritematos Moreland I. W.
Tabelul T. Nivelurile de anticorpi a colagenului de tip (AT K1) total (OFNP) și imunoreactiva fibronectinei plasmatice (AFNP) la pacienții cu artrită reumatoidă, cu diferite grade de activitate

I - un grup de pacienti RA cu 1 grad aktivnosti- 2 - Un grup de pacienți cu un grad aktivnosti- 3 - primul grup de pacienți cu gradul de activitate.
* p<0,005- **р<0,05.
În literatura de specialitate, există puține dovezi cu privire la nivelul de anticorpi a colagenului de tip I la pacienții cu lupus eritematos sistemic. Severitatea manifestărilor clinice difera la diferite grade de activitate a bolii. Este firesc să presupunem că nivelul de anticorpi a colagenului de tip I variază, de asemenea, la diferite grade de activitate. Titrul de anticorpi la colagen de tip I, definit de autorii acestei publicații la pacienții cu lupus eritematos sistemic, a fost de 1,12 ± 0,19. In grupul de control a fost dat indicele de 0,60 0,03. Diferența dintre titrul anticorpului la colagenului de tip I la pacienții cu lupus eritematos sistemic a fost semnificativ mai mare decât grupul de control (p<0,01) (табл. 2).
Tabelul 2. Nivelurile de anticorpi a colagenului de tip I (AT K1), totalul (OFNP) și plasma fibronehina negativ (AFNP) la pacienții cu lupus eritematos sistemic, scleroderma sistemică și artrita reumatoidă și în sănătoși

+r<0,001- **р<0,025- ***р<0,05.
În nivelurile de anticorpi de studiu pentru a colagenului de tip I în grupele de pacienți cu lupus eritematos sistemic, cu diverse grade de activitate a procesului a arătat că în grupul cu gradul minim de activitate la colagen nivelurile de anticorpi nu a depășit nivelul specificat anterior, în grupul de control (p>0,05). Cu toate acestea, cu o creștere a gradului de activitate al titrul anticorpilor lupus la creșterea colagenului de tip I. In grupuri cu moderata pana la grad ridicat de activitate cifra semnificativ peste nivelul normal (p<0,025) (рис. 2).
In sclerodermie sistemica Rowley M.J. și colab. (1987) au raportat niveluri crescute de anticorpi la colagen de tip 1, în timp ce Mackil A. M. et a)., 1982, au raportat un nivel scăzut de anticorpi pentru a colagenului de tip I de la acest grup de pacienți.

RBS. 2 nivele aitntel de colagen de tip I la pacientii cu margine lupus sistemic cu minimum (1 c.) Utorennoy (2 c) și mare (t 3) gradul de activitate
Anticorpii la colageni tip I și III au fost identificate la 75% dintre pacienții cu sclerodermie localizată (Samsonov V. A. și colab., 1990), în 70% din anticorpi față de colagen denaturat (gelatina) (Suchkova TN și colab., 1989) .
judecăți despre Ambiguitate nivelul de anticorpi a colagenului de tip care formează baza matricei intercelulare a pielii și, prin urmare, cel mai adesea afectate în scleroza sistemică, ne-a determinat să efectueze un studiu cuprinzător. Anumite cu un nivel mediu de anticorpi a colagenului de tip I la pacienții cu scleroză sistemică a depășit considerabil pe cea a grupului de control al donatorilor sănătoși (p<0,0025).

Toți pacienții cu scleroză sistemică au fost împărțiți în trei grupe, în funcție de gradul de activitate a bolii. Nivelul de anticorpi a colagenului de tip I, definit în aceste grupuri au avut următorul model: cu o creștere a gradului de activitate a crescut, în timp ce în toate cele trei grupuri a fost semnificativ mai mare decât grupul de control (figura 3). A existat o corelație semnificativă pozitivă între nivelul de anticorpi la colagenului de tip I și gradul de activitate sclerodermie sistemica (r = p + 0,59-<0,025).
Atunci când nivelul de anticorpi la studiul colagenului de tip I în grupele de pacienți cu stadii primare și generalizate terminale sclerodermiei sistemice a arătat că este cel mai mare în grupul de etape generalizate și nivelurile de anticorpi semnificativ mai ridicate la colagen tip I în grupuri cu sclerodermie primare și stadiu terminal (p<0,025) (рис. 4).
Titrul de anticorpi la colagen de tip I a fost determinat la pacienții cu sclerodermie sistemica cu diferite sindroame clinice: grupul cu fibroza pulmonara bazala si sindromul CREST-sindromul Sjogren (Tabelul 3). Conform informațiilor primite, nivelul său cel mai mare detectat la pacienții cu sindrom Sjogren, depășind ca la pacientii cu CREST-sindrom și bazal fibroză pulmonară (p<0,025). Наименьший уровень антител к коллагену 1 типа выявлен у больных с CREST- синдромом.
Astfel, atunci când mai multe boli difuze ale țesutului conjunctiv detectate niveluri crescute de anticorpi la colagenul de diferite tipuri, dar rolul lor în patogeneza acestor boli este neclară. Cu toate acestea, datele acumulate sugereaza un anticorpi patogene pentru colagen. Lichidul sinovial obtinut dintr-o articulație afectată de artrita reumatoida, identificat anticorpi la colagen. Folosind metoda de hemaglutinare pasivă și prin imunofluorescență sa constatat că la pacienții cu artrită reumatoidă, titrul de anticorpi la colagen în lichidul sinovial decât în ​​ser (Mensel J. și colab., 1978), ceea ce indică faptul că producția locală de colagen imunogenă.
Tabelul 3. Nivelurile de anticorpi a colagenului de tip I (AT KI), total (OFNP) și fibronectinei plasma imunoreactiv (AFNP) la pacienții cu scleroză sistemică, sindromul Sjogren, fibroza pulmonara bazala si CREST-sindromul

Sinoviala a articulatiilor afectate de artrita reumatoida, prin imunofluorescență a relevat complexele colagen anticorpi la colagen. Introducere în cavitatea genunchiului iepurilor sănătoși complecșilor vitro anticorp artrite preparate în colagen indusă de colagen proliferative (Steffen S. și colab., 1980).
În ciuda opinia unor autori (Mackel AM și colab., 1982) cu privire la rolul minor al anticorpilor la colagen în patogeneza bolilor de țesut conjunctiv difuze, pare hotărâre mai rezonabilă cu privire la rolul important al anticorpilor
colagen, dar rolul lor în patogeneza acestor boli este neclar. Fie formarea de autoanticorpi la colagen initierea leziuni tisulare de cuplu, sau formarea de complexe imune secundare și este o consecință a distrugerii țesutului și eliberarea de colagen imunogene - necunoscut.