Metode pentru determinarea reactivității imunologice - abilități practice pediatru

DISPOZIȚII GENERALE

In practica pediatrică utilizate pe scară largă teste cutanate alergologice cu teste microbiene și non-microbiene antigeni tuberculină studiul fracțiuni proteice și imunoglobuline serice, mucus ale tractului respirator superior și a altor egestas pune aglutinare, precipitare, imunofluorescenta, fixarea complementului (RSK), reacția Coombs , studiile sunt factori de protecție nespecifice -. C-reactive protein, interferon, properdină, completează etc. orientarea spre expound principiile unui anumit Otori utilizate cel mai frecvent de cercetare imunologice.

METODE NESPETSITSIFICHESKOY Reactivitate

Activitatea complementului hemolitic. Complement (sin. Aleksin) este factorul de protecție nespecifică, care este inclus într-un număr de proteine ​​serice. Conform OMS nomenclatura sistemului complement este notat cu C, iar componentele individuale - numerele de la 1 la 9 (Ci, C2, C9). Sistemul complement 8 sunt proteine ​​individuale, iar Sd reprezintă un complex, care include sistemul properdină 4 proteină 1 de enzimă și inhibitor-2 enzimă. Proteinele sistemului complement poate fi activat în secvență în conformitate cu principiul de amplificare biologică în antigen - (. C3-proactivator, C-proaktiva-torkonvertaza, Factor de cobră et al), factorii de anticorpi sau nespecifice. Ser, încălzită la 56 ° C timp de 30 minute, își pierde activitatea complementară. Complementul este capabil să se alăture antigen - anticorp, bazat pe ceea ce RSK. Există mai multe versiuni ale DGC. A redus titru complement observate cu un grad pronunțat de sensibilizare a organismului, unele boli autoimune (colagenoze și colab.).
La nivelul complementului în ser este judecat de activitatea sa hemolitică. Cel mai des utilizat metoda de determinare a activității standardizate complement hemolitică cu 50% hemoliză. Metoda se bazează pe principiul că complementul seric determină hemoliza eritrocitelor de oaie sensibilizate în prezența serului de iepure imunizat cu eritrocite de oaie (ser hemolitic). Activitatea de completare este luată în considerare în unități hemolitice convenționale. O unitate hemolitică de 50% - este o cantitate de complement care determină hemoliza de 50% de 0,5 ml de suspensie standard a hematiilor sensibilizate la 37 ° C timp de 45 min. În serul indivizilor sănătoși conține 20-40 unități hemolitic complementului.
properdină. Aceasta se referă la o nespecifici factori imunitar. În prezența complementului și ioni de magneziu properdină prezintă un efect bactericid și este capabil să inactiveze unele virusuri. In serul sanguin uman normal conține 08/04/10 unități. properdină.
Pentru a determina nivelul de ser properdină metoda de titrare zimozanovy utilizată. Ea se bazează pe capacitatea de a se lega la zimosan polizaharid properdină. Complexul rezultat cu properdină - o a treia fracție inactiveaza zimosan completează (Cs). Interpretarea rezultatelor obținute prin gradul de inactivare a Cs.
Determinarea proteinei C reactive. In serul sanguin al oamenilor sănătoși, proteina C reactiva nu este determinat. Acesta se gaseste in procesele inflamatorii acute, bolile care implică distrugerea țesuturilor, și este un indicator al activității acestor procese.
Mărimea capilară din sticlă 0,4 X 100 mm câștigă antiser la 1/3 din volum și același volum de ser pacient. Scuturarea capilar de 12-15 ori, reactivii conținute de acesta este agitat. Apoi, tubul capilar este menținut într-o poziție orizontală, iar capătul acestuia cufundat într-un plastilină într-un mod care, atunci când capilarului conferind amestecului poziție verticală, a fost într-o coloană de aer, fără a atinge plastilinei. Reacția poate avea loc la temperatura camerei, apoi un rezultat de inventar preliminar produs după 4 ore, iar în cazul în care amestecul este incubat într-un termostat la temperatura de 37 ° C. - 2 ore după rezultatul final este luat în considerare menținerea amestecului de zer în capilar, la temperatura camerei, timp de 18-20 h , t. e., la sfârșitul zilei. Prezența proteinei C reactive indică pierderea precipitat: înălțimea precipitatului stabilit în

1. mm este evaluată ca fiind unul cruce (+), a 2 mm - (+). în
2. mm - (+ + +) „este de 4 mm sau mai mult - (+ + +).

Titrul aglutinele heterofili. Factorii de imunitate naturală sunt aglutinele nespecifice heterofili, care sunt formate ca răspuns la un efect spontan asupra corpului antigenelor pe scara larga de mediu. Titer aglutininelor heterogene în ser depinde de vârstă: în primii 5 ani de viață, este în creștere, iar la bătrânețe - cade. La adulți sănătoși, titrul de aglutinare heterofil în diluții variind de la 1: 8 până la 1:32 (01:16 în medie). Titrurile au fost determinate așa cum este descris în Paul - Bunnelya.
lizozim. Aceasta este - unul dintre factorii de protecție antimicrobiană inerente care se găsește în fluidul lacrimal, sputa, piele, sânge, ser, lapte, rinichi, ficat, inima si alte tesuturi ale corpului uman. Deosebit de bogat această substanță leucocitele și fluidul lacrimal. Pentru prima dată lizozimului a fost descoperit de Fleming A. (1922). Studii Yermolyeva 3 V. și colab. (1968) au arătat că lizozimul este o muramidaza enzimă, peptidopolisaharidy distruge pereții celulelor de bacterii.
Există mai multe metode pentru determinarea activității biologice a lizozimul, o cale de diluții seriale ale microbului de testare, metoda turbidimetrică și difuzarea pe agar.
Conform literaturii de specialitate (3 Mikhailova, AP A Mikheev, 1966), copiii din primii ani de viață și de lizozim titru neonatală semnificativ mai mare decât cea a adulților.
Activitatea fagocitară a leucocitelor. Fenomenul fagocitozei ca factor major al imunității naturale a fost deschis IM Mechnikov. Capacitatea de a digera si de a absorbi microorganismele și alte particule străine sunt neutrofile în sânge (macrofage), monocite și celule ale sistemului reticuloendotelial (macrofage mobile și fixe).
In vidalevskoy vitro prepararea unui amestec format din 0,1 ml de citrat de sodiu într-o soluție de 2%, 0,2 ml de sânge investigate și 0,1 ml de suspensie de testare organism (Staphylococcus № 209 sau altele asemenea.) Se obține din cultura agar și zilnic diluat la 400 milioane de organisme microbiene în 1 ml. După agitarea amestecului acestor componente a fost plasat într-un termostat la 37 ° C timp de 30 min. Apoi amestecul a fost centrifugat, stratul superior al nămolului pregăti frotiurilor, fixe amestec Nikiforov acestora și colorate cu Giemsa Romanovskomu-. Mikroskopiruyut de droguri, severitatea fagocitoză este evaluat prin numărul de microbi absorbite neutrofile (număr fagocitare) și numărul de leucocite au demonstrat activitate fagocitară. În acest scop, de navigare 100 de neutrofile. In mod normal, la persoanele sanatoase fagocitare de celule albe din sange constituie 50-70%, iar numărul fagocitar - 2-4.
Reacția de transformare blastică limfocite (RBT). Această capacitate de a transforma limfocite în celule blastice nediferentiate prin cultivarea leucocitelor in vitro pe mediu artificial. Un astfel de proces poate fi indusă de agenți specifici și nespecifici. stimulator nespecifica este proteina phitohemaglutin vegetală, sub influența care după 72 de ore există o transformare a limfocitelor în celulele embrionare mari, și multe dintre ele sunt într-o stare de meioză.
În lucrările multor cercetători a demonstrat că numărul de boli grave RBT limfocite obținute la acești pacienți, în mare măsură deprimat. Îmbunătățind în același timp starea pacienților capacitatea limfocitelor transformate prin acțiunea stimulentului în celulele blast de recuperare.