Metode citogenetice de cercetare - abilități practice medic pediatru

Video: abilități practice TSMU 2016 6 ani

Video: Un studiu al mișcărilor respiratorii

Dintre metodele citogenetice pentru practica clinică sunt analize cariotip importante și determinarea sexului cromatinei.
Cariotip. Cariotipului studiat în culturi celulare, crescute in vitro. Pentru a stimula leucocitele la fitohemaglutinină utilizat mitotic stare de tranziție (2 picături 8-10 din sânge periferic cm3 introdus la cultura). In faza de activitate mitotică pentru a fixa cromozomi prin materialul tratat colchicină (la o concentrație de 50 * 10-9 M). Tratarea ulterioară soluție hipotonă materialului provoacă umflarea regiunii nucleu și promovează împrăștierea cromozomilor în citoplasmă, care facilitează studiul structurii lor și prin microscopie. Cariotip este de obicei investigată în laborator citogenetic de specialitate.
Determinarea cromatinei sexuale. Sexul cromatinei - un organism cromatinei sub forma unui triunghi sau semiluna, situate în nucleele de diferite tipuri de celule. baza triunghiului sau semiluna adesea localizat pe membrana nucleara, iar partea de sus sau umflătura cu care se confruntă centrul nucleului. La femele în mucoasa orală celulele epiteliale cromatina gasit in 20-70% din nuclee, în timp ce la bărbați - de la 0 la 5%.
Se crede că cromatina sexuală este unul dintre cromozomul X, care este într-o stare relativ inactiv (corp Barr).

Fig. 17. cromatinei sex (corp Barr) este indicat de săgeată.
cromatina sexuală detectată cu ușurință la oricare din principalele colorantului de colorare nucleară. Acesta poate fi găsit în țesuturile corpului, celulele pielii, mucoasa bucală, foliculii de păr, sânge și altele.
Cel mai adesea, cromatinei genitale determinate celulele mucoasei bucale. Pentru a face acest lucru cu o spatulă de metal pentru a îndepărta suprafața interioară a obrajilor și materialul celular rezultat este aplicat într-un strat uniform pe o lamelă de sticlă. Pentru vopsirea frotiu folosind o picătură de soluție 1,5% sau 2 acetat de atsetoorseina. Medicamentul este acoperit cu un capac de sticlă, o hârtie de filtru îndepărtat cu grijă excesul de cerneală, iar după 2-3 minute de la preparare este gata pentru examen microscopic.
Pentru prepararea soluției de colorant durează 1 sau 1,5 g orseina și se dizolvă în 45 ml acid acetic glacial. Soluția este încălzită până când vaporii și 55 ml de apă distilată, apoi se răcește și se filtrează.

In absenta orseina AM Zaharov a propus utilizarea coloranților tiozinovoy grupe: albastru de metilen, colorație azuriu 1. 20-50 mg de unul dintre coloranții se dizolvă în 10 ml de apă distilată. Colorarea se efectuează 2-3 picături de soluție.
Numărarea cromatinei sexuale produc semne microscopice sau MBI-3 IBI-6 cu lentile de imersiune. Count cel puțin 100 nuclee care au contururi netede și coajă netedă reazemă cromatinei sex plicului nuclear (Fig. 17).
Un studiu de cromatinei sex (cromozom X) ajuta in diagnosticul anomaliilor cromozomiale ale cromozomilor sexuali ca sindroame Shereshevscky -Ternera
(45 OC), Klinefelter (47 XXY), trisomiei X (47 XXX). Dezvăluit în studiul numărului de cromatinei sex în nucleul celulei oferă o indicație a numărului de cromozomi X, care este întotdeauna unul mai mult decât corpurile de cromatină detectate.

Video: Abilitati