Metode de cercetare metabolismului proteic - aptitudini practice medic pediatru

reactive protein Determinare în serul sanguin: Video

totalul indicatorilor de proteină din plasmă și sânge ale fracțiunilor sale individuale sunt importante în diagnosticul multor boli.
Determinarea proteinelor serice totale. Acesta poate fi produs prin mai multe metode (azotometricheskie, gravimetrice, nefelometrice, refractometrică, spectrofotometrice și colab.). De testare metode colorimetrice biuret este cel mai specific, suficient de sensibil, precis și practic disponibile. Această metodă este prezentată ca o uniformă pentru determinarea proteinei totale în serul sanguin. Ea se bazează pe principiul că proteinele reacționează în condiții alcaline cu sulfat de cupru, pentru a forma compuși colorați violet.
Echipament pentru determinarea proteinei totale este. La 5 ml de reactiv soluție de lucru biuret (4,5 g de sare Rochelle au fost dizolvate în 40 ml de 0,2N. NaOH, se adaugă 1,5 g C11SO4 • 5H2O și 0,5 g de K1 și se completează până la 100 ml 0,2N. NaOH ) S-au adăugat 0,1 ml de ser sanguin. După 30 min, proba kolorimetriruyut Feke pe o celulă de 10 mm, cu un filtru de lumină verde versus control. Pentru prepararea controalelor la 5 ml de reactiv biuret adăugat 0,1 ml de 0,9% NaCl. Calculul se realizează ca un grafic de calibrare.
Concentrația normală de proteină totală la adulți variază 62-82 g / l. Datele privind vârsta, copiii sunt prezentate în tabelul. 49.
Tab.g. 49. Conținutul de fracțiuni proteice în procente de proteină totală (medie) la vârsta (în J. E. Veltischevu 1979)

Cele mai frecvente cauze ale gipoproteinemip sunt aport insuficient de proteine ​​in dieta (foame de proteine), o inhibare semnificativă a pierderii de proteine ​​si biosinteza proteinelor sanguine.
aport insuficient de proteine ​​în organism se observă în tulburări ale tractului gastrointestinal (îngustarea esofagului, pilorospasm si stenoza pilorica, tumori, inflamația tractului gastrointestinal și altele.), conținut redus de proteine ​​al dietei sau a compoziției de aminoacizi neechilibrat, etc.
Pentru proteine ​​pierderi conduce organism boli renale care apar cu proteinurie, sângerare acută și cronică, exsudate extinse și efuziunile în cavitățile seroase, arsuri, etc.
Hipoproteinemie asociată cu o scădere a biosinteza proteinelor in ficat, apare în hepatita cronică, intoxicațiile, ciroza, procese supurative lungi, și alte boli maligne.
Hiperproteinemie-fenomen este relativ rar. Observat la exsicosis, diabet insipid, ileus, peritonită generalizată, mielom multiplu (rezistent la 120 g / l).
Metode de determinare a fracțiunilor proteice în ser. Investigarea relație cantitativă între fracțiunile proteice individuale este de mare valoare diagnostică, deoarece permite să se diferențieze speciile individuale hipo și hiperproteinemie și o serie de boli care nu sunt însoțite de o modificare a conținutului total de proteine.
Pentru fracționarea proteinelor plasmatice utilizate sărare săruri neutre, fracționare electroforetică, sedimentare și metode imunologice pretsipitirovanie etanol la temperaturi scăzute, cromatografie de filtrare pe gel. Cel mai frecvent utilizate aceste metode electroforetice bazate pe diferite viteze proteinelor de circulație într-un câmp electric în funcție de sarcina lor electrică și alte proprietăți fizice și chimice.
Tehnici de electroforeză pe scară largă pe hârtie și geluri - agar, amidon și altele, în special gelul de poliacrilamidă, cu care puteți obține aproximativ 30 fracțiuni proteice. A devenit din ce în ce electroforeza folosit pe filme de acetat de celuloză. Cu toate acestea, în laboratoarele clinice de diagnostic este utilizat în principal pe hârtie de electroforeză (Kolb VG, VS Kamyshnikov, 1976). Metoda se bazează pe principiul că, sub influența unui câmp electric de proteine ​​din zer constant cu o electric se deplasează pe suport de hârtie umezită cu soluție tampon la o rată care depinde de încărcătura și greutatea moleculară. Proteinele din ser astfel separat în cinci fracțiuni: albumina si globulinele a1, a2, în, în.
Globulina normală și raportul dintre (raport albumină-globulinelor) albumină este de aproximativ 2: 1. Procentajele de fracțiuni individuale de proteine ​​la adulți și copii în funcție de vârsta este prezentată în tabelul. 49. total de proteine ​​și proteine ​​fracțiuni de sânge variază în diferite boli la copii.
La adulți și copii mai mari izolate Următoarele tipuri electroforetice: I) o protsessa- inflamatorie acută 2) subacut vospaleniya- cronică 3) nefrotic simptomokompleksa- 4) novoobrazovanii- maligne 5) gepatitov- 6) ciroză pecheni- 7) mecanică zheltuhi- 8), plasmocitoame și p-globulinelor -.

In primul tip marcat scăderea albuminei și creșterea a1, a2-globulină, și în etapele ulterioare și în a doua globulinov- - moderată scăderea în fracțiuni de albumină și pronunțat creștere a2, y-globulină în a treia fraktsiy- - scăderea semnificativă a albuminei, crescând gruparea a-globulinele scăderi moderate în a patra globulinov- - reducerea albumine și globuline creștere semnificativă a cincea fraktsiy- - scădere moderată în albumine și creșterea y- și (3-globulinov- sasea - cu o scădere puternică a albuminei velichenii y-globulină fracție a cărei rasshireno- de bază în a șaptea - o scădere a albuminei și o creștere moderată a SS2-, P- și y-globulinov- în a opta - proteina totală a crescut dramatic, albumină și globuline cel mai redus, în funcție de tipul de creștere suplimentară y sau în glo- Bulin.
La sugari, există o insuficiență biosinteza fiziologică în globulinele. Prin urmare, bolile infecțioase au în-a2 și globulina au crescut mai mult decât cea a copiilor mai mari și adulți. Îmbunătățirea continuă a y-globulina la sugari poate indica o stare septică.