Metode medicale si genetice de cercetare - neurologie pediatrica

Video: V-lea de atribuire publice naționale în domeniul bolilor rare „Blue Bird“

boli ereditare ale sistemului nervos, este important să le distinge de phenocopies reprezentate de factori nocivi exogeni. Metode de cercetare genetice fac posibilă pentru a confirma sau respinge natura ereditară a bolii, determină desfășurarea intervențiilor terapeutice. În plus față de metodele speciale genetice de cercetare (studiul de tabele genealogice, gemene, citogenetice, metode biochimice de cercetare), stabilirea diagnosticului bolilor ereditare pentru a ajuta la cercetarea clinică (în special, identificarea stigmate dizembriogeneticheskih) și unele metode paraclinice. Deci, care deține electroencefalograf copii sănătoși și părinții și rudele bolnave simultan, în unele cazuri, contribuie la stabilirea caracterului ereditar al sindromului epileptiforme. Realizarea electro clasice, chronaximetry, electromiografia poate ajuta în diagnosticul diferențial al bolilor ereditare și phenocopies lor.

Prepararea si analiza clinico-genetice a tabelelor genealogice.

Video: Petrova NN Direcții de studii genetice ale schizofreniei

Elaborarea tabelelor genealogice este o metodă importantă pentru studierea pacienților cu boli ereditare ale sistemului nervos.

Fig. 72. Simboluri în compilarea genealogii.
1 - pol 2 femei - pol masculin 3 - bolnye- 4 - suprugi- 5 - nelegitimă comunicare- 6 - de două ori zhenatyy- 7 - 8 copii cu - bliznetsy- monozigoți 9 - 10 bliznetsy- dizigoți - interseks- 11 - etaj nu este vyyasnen- 12 - copil urodstvami- 13 - pacient cu formă abortive zabolevaniya- 14 - 15 proband- - fenotipic purtător sănătos al unui priznaka- 16 recesiv - purtătoare recesivă putativă priznaka- 17 - neconfirmat date anomalii- 18 - a murit devreme detstve- 19 - a murit la vârsta de 20 de ani- - avort spontan, mertvorozhdennyy- 21 - scrisoare de identificare

Pentru un simbol al pacienților, rudele lor, strămoșii și descendenții folosind simboluri. Bărbații reprezintă pătrate, femei - cercuri. Soțul și soția - un pătrat și un cerc, conectate printr-o linie orizontală. Din această linie dreaptă perpendicular pe linia de conectare este îndreptată în jos pentru copii, semne de care sunt aranjate în ordinea vârstei: mai în vârstă din stânga, din dreapta jos. Desemnările verii sunt plasate pe aceeași linie orizontală, deoarece ele aparțin aceleiași generații (Fig. 72).
Boli remarcat semn convențional sau o scrisoare inițială a numelui bolii. desemnari speciale sunt disponibile pentru decesele care au fost înregistrate copii, născuți morți, avorturi spontane și medicale și așa mai departe. D.
Analiza tabelelor genealogice pregătite set permit moștenirea unei boli sau trăsătură. Pentru a stabili tipul de moștenire este uneori crucială în diagnosticul anumitor boli cu simptome clinice similare, ajută la determinarea prognosticul si strategia terapeutica.

Fig. 73. genotipice și fenotipice variații în diferite tipuri de moștenire
A. genotipice și fenotipice variante cu dominante (1) și autozomal recesiva (2) moștenirea autosomal tip. Roșu reprezintă gena mutantă, cu majuscule - alela dominantă. Piața Roșie - un fenotip anormal.
B. genotipice și fenotipice variații în succesiune angajate cu cromozomul X (mutația recesivă in cromozomul X). Roșu reprezintă cromozomul X cu gena mutant. Piața Roșie - un fenotip anormal.

Video: Consultativ - centru de diagnosticare „Căsătorie și Familie“

Repetiția a bolii în fiecare generație, atunci când părinții copilului bolnav se naște cu aceeași boală, cel mai adesea se referă la modelul dominant de moștenire. Atunci când tipul recesiv de mostenire a bolii apare de obicei la copiii născuți din părinți sănătoși, cu boli similare, uneori, pot fi detectate printre rudele aripilor (veri, unchi, matusi, nepoti).
Unele boli sunt transmise prin mod recesiv, cu ochiuri X-cromozom.
Modul dominant și recesiv moștenire este determinată genă dominantă sau recesivă care determină caracteristica sau boala.
După cum se știe, jumătate copil de 46 de cromozomi de la mama ei primește jumătate - de la tatăl său. Fiecare genă în cromozomul matern 23 are alela t. E. Un cuplu, gena asociat în cromozomul 23, a primit de la tatăl său. Funcția normală poate fi asigurată prin prezența chiar una dintre gene alelice. In cazul mutației unuia dintre genei alelice (recesiva) a celeilalte gene (dominantă) este compensată complet sau aproape complet pentru funcția Nogo mutant. Prin urmare, manifestarea clinică a unei mutații a genei recesive este posibilă numai atunci când se produce mutația identică în a doua gene alelice introduse în genotipul copilului și tată și mamă (Fig. 73).
În autozomal recesiva moștenire de tip doi bolnav părinte copil trebuie să aibă una dintre cele două alele mutante recesive (stare heterozigotă). Părinții cu practic sănătoși. fiecare jumătate părinte de gârneți va transporta genei mutante, jumatate - non-mutant. La confluența gameți sunt patru opțiuni posibile: a) ambele gene sunt mutante - copilul este bolnav (homozigot) - b) atât gena de tip sălbatic - copil zdorov- c) mama genei mutante, plus gena non-mutant tatăl lui - copilul este în stare bună de sănătate, dar este heterozigot g nositelem- ) tatăl genei mutante, plus gena non-mutantă a mamei - același rezultat ca și în versiunea anterioară. Ca urmare, atunci când un autozomal recesiva tip moștenire 25% dintre copii sunt bolnavi și sănătoși 25% 50% (25% + 25%) ca sănătoși, dar sunt purtători ai heterozigote genei mutante, precum și părinții lor. Aceste relații sunt dezvăluite doar atunci când un număr mare de copii în familie.
gene recesive localizate în autozom poate psevdodominantny determina modul de moștenire, care se observă în cazul în care un părinte - purtător heterozigotă și alte rele, adică are o mutație a ambelor alele ... Fiecare părinte bolnav gamet are gena mutant. Prin urmare, probabilitatea de 50% dintr-o naștere unui copil bolnav, 50% - purtători heterozigoți clinic sănătoși. boală în generațiile de repetiție creează o falsă aparență de moștenire dominantă.

Fig. 74. variații ale genotipului cu nondisjunctie cromozom sexual

Tabelul genotipică Variante în nondisjunctie normale și sexul cromozom. cromatinei sexuale în sănătate și nondisjunctie cromozom sexual (schema).
gene mutante recesive, situate in cromozomul sexual feminin cauze recesiv moștenire, legată de cromozomul X (Fig. 74). Femeile, în general, nu devin bolnav, ca și în cazul în care acestea au o genă mutantă într-un cromozom X-al doilea cromozom X cu o genă alelă de tip sălbatic asigură menținerea funcțiilor normale. Femeia este jumătate purtătoare, astfel, heterozigot celulelor sale germinale va avea X-cromozom cu gena mutant. La o întâlnire cu sperma care transporta cromozomul X, o astfel de gameți va da naștere la dezvoltarea organismului feminin - purtător heterozigot. La întâlnirea ei cu sperma care transportă cromozomului Y, se nasc băiat bolnav ca a lui cromozom Y nu este o genă mutantă a genei alelică cromozomul X. Atunci când pacienții de sex masculin casatorite, cum ar fi hemofilia, sănătatea femeilor toți băieții din familia sa născut sănătos, așa cum este obținută de la un pacient tată, „sănătos“ cromozomului Y, iar fetele - purtători heterozigoți ( „conductori“).
Când un bărbat căsătorie sănătoasă, cu o femeie de băieți „conductor“ se va naște bolnav doar în jumătate din cazuri, fetele vor fi purtătoare heterozigoți sunt, de asemenea, doar jumătate din cazuri.
moștenire dominant are loc atunci când poziția dominantă a genei mutante. Heterozigot gena mutanta dominanta are implicatii clinice. Atunci când un pacient cu o jumătate sănătos partener de căsătorie dintre copii au primit o genă mutantă dominantă și bolnavi, cealaltă jumătate a sănătății copiilor. Trebuie remarcat faptul că gena dominantă poate avea diferite proyavlyaemostyu, penetranta. Penetranta determinată de numărul de pacienți cu un număr total de copii care au primit gena mutantă (în procente).
Cunoașterea sistemului nervos al legilor de moștenire și de tipul de moștenire a unei boli face posibilă pentru a prezice probabilitatea unei nașteri copil bolnav, prezice urmași. Acest lucru se bazează pe consiliere medicală și genetică.
Este important să ne amintim, totuși, că prezența unor boli recurente în arborele genealogic nu dovedește natura sa ereditară. Există cazuri în care re-apariția a familiei de aceeași boală este asociată cu un efect permanent asupra tuturor membrilor de familie ai oricăror factori exogeni (de exemplu, cazurile de epilepsie la rude infectate cu Echinococcus, cu chisturi intracerebrală).
Diferite boli ereditare ale sistemului nervos pot diferi de caracteristicile tip de moștenire. De exemplu, boala lui Lou Gehrig - Marie moștenit de tip dominant, miopatia Duchenne transmise prin recesiv tip X-linked meshed. sistemului nervos boli ereditare, uneori, au vyrazhennost- diferite, împreună cu tablou clinic extinse observate forma abortiva șterse. Acest lucru se poate datora expresivității genei inegale în diferite genotipuri și condiții neuniforme pentru existența organismului individuale. Prin urmare, atunci când se analizează pedigreele importante să ia în considerare în raport cu semne moi ale bolii. Uneori, pregătirea corespunzătoare a tabelelor genealogice este posibilă numai după o examinare atentă (clinic și paraclinic) a rudelor pacientului.
O mare importanță este atașat metode gemene bazate pe faptul că gemenii monozigoți sunt mai concordă pentru boli ereditare decât dizigoți. Metoda Twin este aplicată nu numai pentru diagnosticarea și prognosticul bolii într-unul dintre gemeni, dar, de asemenea, pentru a determina rolul factorilor genetici in patogeneza bolilor sistemului nervos (prin compararea mono- concordanței și perechile gemene dizigoti).
Dermatoglyphics - studiul a printurilor model de piele de palme și picioare. În cazul în care există diferențe individuale în amprente datorită particularităților de dezvoltare a individului, există mai multe clase majore ale acestora. Modificări ale amprentelor Peculiar și a modelelor de palmier sunt marcate cu un număr de boli ereditare degenerative ale sistemului nervos. Pentru sindromul Down se caracterizează prin transversal (tetradigitate) brazda reprezentând o linie care se extinde peste palma în direcția transversală. Schimbarea ATD unghiului: majoritatea pacienților cu sindrom Down unghi depășește 57 °. caracteristici similare pot fi observate la rudele pacienților. Pinkie în loc de două pliuri transversale, unul marcat ori.

Fig. 75. masculin cariotip normal (A) și feminin (B).
Dermatoglyphics folosit, de asemenea, pentru a stabili o geaman mono sau dizigoți.
Metodele Karyological de cercetare includ studiul de cromozomi (cariotipului) și nucleele interfazice ale celulelor somatice.
Studiul cromosomilor se bazează de obicei pe cultura materială a limfocitelor din sângele periferic. Studiul cariotipului este posibilă numai în stadiul de metafază al diviziunii celulare. Cu toate acestea, celulele normale nu diviza, astfel încât mitogeni de cultură din sânge sunt folosite pentru a stimula diviziunea medicamentului (de exemplu, phitohemaglutin). Pentru acumularea de celule în stadiul de metafază al acestei etape este utilizat adrenergice (colchicină și alții.).
Analiza a fost realizată pe cromozomi pe baza dimensiunii și formei lor, precum și detectabile prin metode speciale de colorare diferențiere longitudinală a cromozomilor. Pentru o descriere a cariotipului sunt simboluri special concepute (Paris nomenclatorului).
anomaliile cariotip pot fi împărțite în două grupe principale: tulburări ale numărului de cromozomi (aneuploidie) și perturbarea structurii de cromozomi individuali (reconstrucție).
Într-un cariotip uman normal constând din 22 de perechi de autozomi si sex cromozomi pereche - doi cromozomi X la femei si unul din cromozomul X si un cromozom Y la bărbați (Figura 75.). În timpul formării gameți, fiecare dintre ele primeste 22 de autozomi si un cromozom de sex
Soma. Fuziunea gameŃilor restabilește set diploide normale de cromozomi. Ca urmare a încălcării a cromozomilor în geneza gameto- formate seturi de cromozomi dezechilibrate, în care există un cromozom suplimentar sau cromozom lipsesc. Acest lucru conduce la dezvoltarea unor sindroame relevante sau chiar incompatibile cu viața.
Când rearanjamente cromozomiale poate varia cantitatea de material genetic care determina dezvoltarea unei varietăți de sindroame cromozomiale (în prezent, au descris aproximativ 40). Printre tulburările distinge deleții normale structura cromozomială, duplicări, inserții, translocații, inversiuni și altele asemenea. D.
Eliminarea regiunii cromozomului numit pierdere. De obicei, aceasta este o consecință a unui decalaj în brațul de cromozom cu o pierdere a porțiunii distale. Un exemplu de sindrom de ștergere este o pisica sindrom plâns.
Inversiunile și translocații sunt rezultatul a două pauze cromozomiale. Inversion - schimbare în secvența siturilor cromozomiale - este format de cele două goluri în termen de o porțiune de cromozom și pivot situate între punctele de discontinuitate 180 °. Care nu conține centromeres porțiunea centrală poate fi pierdută, rezultând formarea de deleții interstițiale. Punerea în aplicare a celor două pauze în doi cromozomi diferite pot fi asociate cu site-uri cromozomiale translocare. Inversiune și translocarea nu duce la pierderea sau câștigul de material genetic, și de aceea au un efect redus asupra fenotipului rearanjamente purtătoare. Cu toate acestea, prezența unor astfel de modificări într-un părinte cauzează adesea copii seturi de cromozomi neechilibrate (cu deletii si dublurile - o dublare a secțiunilor individuale ale unui cromozom). Și aproximativ jumătate din cazurile detectate de anomalii cromozomiale este rezultatul părinților rearanjamente cromozomiale.
anomalii cromozomiale nu poate fi moștenită, dar poate apărea în orice moment al embriogenezei. În acest caz, se găsește doar în unele celule (mosaicism).
Sexul cromatinei în contrast cu studiul de cromozomi in nuclee de celule somatice interfazice, care nu necesită cultivarea lor prealabilă. Distinge X cromatinei sex (corp Barr) și cromatinei Y-sex.
cromatinei X sex este inactivat X-cromozom. Indiferent de numărul de cromozomi X intr-o celula este activ doar una dintre ele, în timp ce restul se condensează în corp Barr - tufe mici dens pătate situate în apropierea membranei nucleare. În cazul încălcării numărului X-cromozom Barr celule schimbă, dar numărul maxim de unul mai mic decât numărul disponibil în cromozomi X celula. De aceea, la bărbații normali vițel nu este aproape detectabil, iar femeile în unele celule (în funcție de tipul de țesut și caracteristicile fiziologice ale unui organism) a arătat un singur corp Barr.
Când colorarea nucleilor interfazice anumite Fluorocromii (de exemplu, quinacrine mulți derivați ai acestuia) pot fi detectate
cromatinei Y-sex - viu la fața locului luminos în nucleu. În funcție de tipul de țesut și caracteristicile fiziologice ale unui frecvență organism de detecție Y-cromatină variază oarecum, dar numărul maxim de locuri egal cu numărul de Y-cromozomi (0 - femei 1 - la bărbați 2 - când sindrom XYY).
Deoarece analiza cromatinei sex este simplă și nu necesită o cultură de celule (de obicei analizate răzuire epiteliului mucoasei bucale), această metodă este utilizată pe scară largă pentru diagnosticarea rapidă a anomaliilor cromozomiale sexuale suspectate. analiza cromozomiala este mult mai multă muncă, vă permite să obțineți mult mai multe informații și este un pas important în diagnosticul mai multor sindroame congenitale și ereditare.