Examinarea sanitar-bacteriologică a produselor alimentare pentru prezența Staphylococcus - microbiologie cu tehnica testelor microbiologice

STUDIU PRIVIND stafilococi DISPONIBILITATE

Stafilococii sunt cel mai adesea mediu favorabil pentru reproducerea în alimente cu mai multe proteine ​​și amidon (lapte, produse cu cremă, înghețată, brânză, tartinabile, pește fiert, carne, piure de cartofi, conserve de pește sub ulei).
Metode de studiu. Produse consistență lichidă inoculat pe mediu solid de cultură (1-2 picături) și mediu de stocare (sare) 0,5-1 ml. consistența groasă a produsului este diluat cu apă de la robinet sterilă, solid - măcinat și pulverizat cu apă într-un mojar. Din emulsie preparată sau mash preparate frotiurilor colorate Gram și mikroskopiruyut, observând prezența stafilococilor (single, mici, mult). Simultan face culturile în mediul de stocare de conținut 10 și clorură de sodiu 6,5% și paharul vitelin cu soluție salină agar (mediu Chistovich).
mediu de stocare 1
peptona Carne 1 litru
Clorură de sodiu 65 g
Agar 1 "
Lactoză 15 "
mediu de stocare 2
peptona Carne 1 litru
100 g de clorură de sodiu
Agar 1 "
Lactoză 15 "
pH 7,4. Se sterilizează la 120 ° timp de 30 de minute.

Miercuri Chistovich - agar vitelin-sare. Agar-agar-carne-peptonă cu clorură de sodiu 10%, se sterilizează la 120 ° timp de 30 minute, topit, se răcește la 45-48 °, se adaugă 20% în volum gălbenușul suspensie (un gălbenuș de ou la 150 ml de soluție fiziologică), se amestecă bine, se toarnă în cupe . Mediul poate fi preparat pentru o utilizare viitoare și se depozitează în frigider.
Culturi sunt puse într-un termostat la 37 ° C timp de 48 ore. Cazurile pozitive vitelin pe ser stafilococ patogen-agar agar cresc pentru a forma un pigment (tulpinile care formează un pigment și diferite nuanțe de crem portocalie trebuie considerată de aur) și zona din jurul turbiditate coloniei (dacă lecithinase distruge lecitină mediu nutritiv). Aceste colonii au fost subcultivate 1) pe plăci de agar de sânge pentru a studia hemolyzing svoystv- 2) pe agar pentru 16-24 înclinate formulare ore prin reacția plazmokoagulyatsii- 3) un bulion de zahar (la 6 ore un termostat la 37 °) pentru a studia morfologia ( mici coci, acinară locație).
Dacă după 24 de ore plăci de agar de sânge PAS nu a apărut hemoliza, le lasă timp de încă 24 ore la temperatura camerei. In absenta hemolizei face subcultură repetate pe vas de sânge agar cu semănatul a fost plasată într-un desicator conținând 20% C02 și plasat într-un termostat la 37 °. După 24 de ore de creștere în atmosferă a pierdut hemolyzing C02 proprietăți sunt recuperate. Pentru formarea de CO2 în partea de jos a desicator 1-2 litri volum cupa este plasat cu bicarbonat de sodiu (2,1 g) și gaura fină prin pipeta stânga se toarnă 16-18 ml de acid clorhidric 10%.
Din pantă cultura de Staphylococcus ia buclă și aplicată într-un tub de testare cu o diluție 1: 4 din plasmă umană sau sânge de iepure citrata. Pune în incubator la 37 ° C și timp de 1 -10 oră a fost observată la fiecare oră apariție cu plasmă coagulare. In acele cazuri în care vitelin pe ser agar-agar (VSA) Nici o creștere Staphylococcus coloniilor suspecte, ceea ce face reînsămânțarea medii de stocare per vas cu agar vitelin-sare și se continuă analiza procedurii de mai sus.
Într-un studiu al produselor într-un mod planificat poate fi limitată la anumite proprietăți de bază ale stafilococului pe diagrama. În cazurile de intoxicații alimentare se face un studiu mai detaliat al tulpinilor de Staphylococcus izolate, adică. E. Determinarea prezenței toxinei și gradul de activitate hemolitică.
Proba biologică este descrisă în „Microbiology Private“ (p. 202), dar se poate proceda după cum urmează. Tulpina izolată este inoculat pe plăci cu Aureus 0,75% agar în bulion sau vițel infuzie pe Hottinger bulion cu% glucoză 0,25 (pH = 7,0). Cănile au fost plasate într-un exicator cu 20% și C02 plasată într-un termostat la 37 ° C timp de 2 zile cu susul în jos. După 48 de ore, scos și suprafața agarului se toarnă 10 ml soluție salină. Agar strivit cu o spatulă până la consistența păstoasă și se lasă la temperatura camerei timp de 2 ore. După ce extractul a fost transferat în tuburi și centrifugat pentru a se obține un strat transparent, care se filtrează prin aspirație. Încălzit într-o baie de apă care fierbe timp de 30 minute și se administrează la pisici într-o venă a urechii sau vena femurală într-o cantitate de 0,5 ml per 1 kg greutate corporală. Apariție de vomă și diaree sau voma numai, în perioada următoare de la 30 minute până la 3 ore indică prezența toxinei. pisoi 12-2 sau ia luni și postul administrat pipetată în gura de 15-20 ml Negrete toxină amestecată cu lapte sau smântână. 30-60 minute începe vărsături, diaree, uneori, și prostrație generală. Observarea se efectuează timp de 4-5 ore. Puteți introduce un soarece alb, toxina printr-un tub in esofag.
Pentru confirmarea finală a rolului în etiologia intoxicațiilor alimentare stafilococice selectat acest lucru este necesar pentru a pune reacția de aglutinare cu serul sângelui pacientului. Ca un antigen ia tulpina izolată de Staphylococcus. Reacția este plasată pe tipul reacției Widal, începând cu diluția 1: 50 până la 1: 800. Ca martor, este de dorit să pună reacția aglutinare este cunoscută în mod clar tulpina toxic.
Recent, produc lizotipia stafilococi patogene, care să permită stabilirea identității culturilor izolate din diferite site-uri și de către persoane diferite, ceea ce este important pentru serviciul de sanatate.