Apendicele - criptosporidioză și HIV

Video: Ziua Internațională împotriva infecției cu HIV și SIDA. Ryazan 12.01.2014. E interesant.

I. să fie chestionate contingente:

1. Pacienții cu sindrom de diaree de lungă durată.
2. Pacienții sunt spitale infecțioase intestinale.
3. Pacienți cu infecție HIV cu semne de disfuncție intestinală.
4. Persoanele care intră în contact cu pacienții recupera de la cryptosporidioza anterior (convalescenți).

II. Materiale de testare:

1. materiile fecale ale pacienților.
2. Voma.
3. spută și lichidul de lavaj (suspectat cryptosporidioza respiratorie).

Fecalele sunt colectate într-un loc curat recipiente bine sigilate, uscate și transportate la laborator. Ouăcistele în fecale sunt stocate pentru o relativ lungă. În cazul în care este destinat materialul de stocare pe termen lung, utilizați conservanți (10% formalină lichid Barbagallo, soluție de bicromat de potasiu 2,5%). Conservant amestecat cu fecale într-un raport de 2: 1 și se agită bine. A se păstra la frigider la + 4 ° C Oochiști în soluție de bicromat de potasiu 2,5% rămân viabile pe tot parcursul anului.

In cazurile simptomatice cryptosporidiozei în frotiurilor colorate de fecale a găsit un număr semnificativ de oochisti. .. O examinare a persoanelor de contact și convalescenți, adică cu concentrație cunoscută scăzută de oochiști în fecale, sunt utilizate tehnici de îmbogățire - flotație și sedimentare.

III. Mod de preparare si pictura frotiuri fecale:

Pe glisiera o cantitate mica de fecale depozitate și frotiu strat uniform subțire. Dacă este necesar, o bucată de fecale pot adăuga 1-2 picături de soluție salină. Frotiul este și fixat în amestec Nikiforov uscat cu aer (un amestec de părți egale de eter și alcool etilic 96 °) timp de 10-15 minute, apoi din nou uscate cu aer și colorate, și apoi supus microscopie.

I. fucsin carbolice colorația Ziehl-Nielsen:

Fixarea Pap petrec rapid de 3-5 ori peste flacăra arzătorului. Soluție Stain carbolfuchsin 5-20 minute. Compoziția soluției: fucsină de bază - 2 g, 96 ° etil spirt- 12 ml, fenol - 5 ml, apă distilată - 100ml până (magenta se dizolvă în alcool a unui fenol-apă, apoi se contopească).

Se clătește cu apă de la robinet frotiu, decolorate, 7% (5-10%) soluție de acid sulfuric timp de 20-60 secunde. clătite cu apă și nuanță timp de 5 min cu verde malachit apos 5% în 10% etanol sau albastru de metilen apos 0,2%. Se clătește în apă, bine uscate în aer și se examinează la microscop cu imersie.

Rezultate. oochisturi sunt colorate în diferite nuanțe de culoare roșu aprins și au forma unor formațiuni rotunjite până la 5 microni în diametru. În interiorul unora dintre ouăcistelor pot fi studiate sporozoiți alungite. microfloră înrudite este vopsit în tonuri de verde.

Comentarii: Culoarea roșie poate fi vopsit cu o picătură de substanțe și perle de grăsime cum ar fi grohotis. Chiar și o similitudine accidentală în mărime, aceste formațiuni pot fi distinse cu ușurință de oochisturi prin lipsa lor de membrană distincte, precum și conținut structurat în interior. În cazurile îndoielnice, frotiului de serie ar trebui să picteze o metodă diferită. Dacă este necesar, pentru a reduce concentrația de malachit verde (ales empiric). Colorația Ziehl-Nielsen poate fi făcută fără fixarea prealabilă a frotiurilor.

Această metodă este considerată a fi una dintre cele mai informative și de încredere pentru detectarea oochisturi.
Vopseaua nu se estompeze in mai multe luni.

2. Colorarea cu Safranină de Kester.

Pap, aer uscat, fixat într-un amestec de Nikiforov, se usucă din nou la temperatura camerei, pentru a fixa peste flacăra arzătorului. Soluție de colorant Safraninul timp de 5 minute. (Soluție apoasă saturată de Safranină - 2 părți, soluție de KOH 5,6% - 5 părți). După spălare cu apă timp de 10 secunde pentru a se diferenția. în soluție 0,1% de acid sulfuric în soluție de colorant și apă zăbovi la 5% verde malachit (cm. de mai sus) timp de 10-15 secunde. Se clătește în apă, bine uscate în aer și se examinează la microscop cu imersie.
Rezultate: oochisturi sunt vopsite în roz pal și bine evidențiate pe un fundal verde. Alte microorganisme nu sunt colorate cu safranina.
Notă: Această metodă este considerată a fi una dintre cele mai precis in detectarea oochisturi, permițând cel mai clar vedea conținutul interior al ouăciste (sporozopty). Pictura medicamente instabile se estompeze rapid și nu sunt potrivite pentru stocarea pe termen lung.

3. Colorarea cu azur-eozină de Romanovsky-Giemsa.

Această metodă de colorare frotiuri de sange pe scara larga poate fi folosit cu succes în coccistului kriptosporody de identificare. În unele cazuri, este foarte informativ, ca și cu pregătire prealabilă corespunzătoare frotiu vopseaua pătrunde coccistului și sporozoiți culori.

Pap, amestec Nikiforov fix și complet cu aer uscat, prevesti rapid peste flacăra arzătorului (3-5 mișcări rapide). Stain soluție colorantă 10%, de la 10 la 35-40 minute. Se clătește bine cu apă (de preferință, sub jet de apă), se usucă în aer (este posibil într-un jet de aer rece sub uscator de par) și examinate la microscop cu un sistem de imersie.

rezultate: oochisturi sunt necolorat sau formă slab colorate rotunjite formațiuni la 5 microni în diametru. In interiorul unora dintre ouăcistelor pot fi studiate corpurile albastru pal alungite și ușor curbate (sporozoiți) cu granule roșiatice interior. Sporozoiții sunt situate la periferia ouăcistelor, lăsând partea centrală goală.

Notă. ouăciste de identificare dificile datorită faptului că și alte microorganisme intestinale, de asemenea, colorate cu azur-eozină, și mult mai intens ouăciste. În acest sens, este necesar să se facă frotiuri subțiri, în care impunerea microflorei nu este „evadare“ la ultima observatorului. Produsele pictate nu se estompeze in mai multe luni, sunt potrivite pentru depozitare pe termen lung.

Video: Oamenii din Kazahstan este încă foarte puține cunoștințe despre transmiterea HIV