Dinamica dependentei de corp de reglare adaptivă în timpul formării răspunsului imun - un nivel total de reactivitate nespecifice

5.2. Dinamica dependentei de corp de reglare adaptivă în timpul formării răspunsului imun inițial UONRO
In studiile anterioare a fost stabilită o corelație clară între starea de adaptare și producerea de anticorpi capacitatea unui organism cu diferite doze de stimulare antigen [Mulik AB, 1992]. În plus, în această lucrare (Capitolul 2) prezintă modificările de reactivitate nociceptive care însoțesc dezvoltarea reacției de stres pe UONRO. După analizarea rezultatelor cercetării disponibile, propunem utilizarea monitorizării cantităților de dureri de sensibilitate a organismului pentru controlul operativ răspunsul imun într-un ser imun producătoare de animal.
Experimentele au fost efectuate pe 34 de iepuri sunt în mod obișnuit imunizați cu celule inactivate de Pseudomonas pseudomallei. La animale, pre-selectate conform criteriilor general acceptate de standardizare, în plus, fundal determinată individual valorile PBCH. Hiperimunizare a fost realizată de către sistemul convențional format din 4 (la intervale săptămânale) injecții intradermice cu doze crescătoare de antigen (10,0 1,0 2,0 5,0 microni. Cl.) Intr-un amestec cu FCA. Odată cu începutul imunizare, animalele de test au fost măsurate zilnic PBCH valoare. Probele de sânge pentru determinarea anticorpilor specifici a fost efectuată în ziua 7 după închiderea imunizare. Nivelul anticorpilor serici a fost detectată în RIA.
Ca rezultat al experimentului are anumite relații ale parametrilor studiați. În primul rând, un răspuns imun plin cu o valoare minimă a titrului de anticorpi de 1: 32 a fost observată în 11 exemplare caracterizate de UONRO predominant de mijloc (38,5 + 4,28 V), care a confirmat dozarea optima a antigenului. În al doilea rând, reactivitatea nociceptivă într-un animal, altul decât un răspuns imun cu drepturi depline în hiperimunizarea, la momentul recoltării sângelui a crescut cu o medie de 12%. Când această sensibilitate crescută durere au stabilizat la 21-a zi de la începutul imunizării (cu o zi înainte de a treia injecție). Trebuie remarcat faptul că dinamica zilnică nociceptive reactivitate modificată drastic imediat după injecție (reducerea sensibilității la 80%) cu valorile de retur ale indicatorului la nivelul inițial după 15-20 de ore. La iepuri, diferite de producție scăzută de anticorpi specifici (valoarea maximă a titrului de anticorpi de 1: 16), sensibilitate la durere la momentul recoltării sângelui a fost mai mic în raport cu nivelul mediu de fond este de 6%. Cu toate acestea, printre animalele cu ridicată UONRO (13 animale) acest indice a scăzut cu 41% 15.7-26.7 + 1,64 + 3,59 V, ceea ce indică faptul fiabilitatea modificărilor sensibilității dureroase (p < 0,02, выгавленной методом Монцевичюте-Эрингене). Такое резкое снижение ноцицептивной реактивности у индивидов, характеризующихся высоким УОНРО, указывает на развитие стресса, связанное с неадекватно высокой антигенной нагрузкой. Напротив, среди животных с низким УОНРО (7 особей) болевая чувствительность повысилась к 21-му дню на 7 %, а к окончанию опыта на 12 %. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии стресса у индивидов с низким УОНРО, что, однако, не является достаточным условием для активной антителопродукции без соответствующего антигенного стимулирования.
Rezumând rezultatele experimentelor se poate trage concluzia că producția de anticorpi activă stabilă este însoțită de o scădere imediată a pragului de durere asigurând în același timp caracterul adecvat UONRO sarcinii antigenic. Mai mult decât atât, sarcină antigenică excesivă provoacă imunosupresie, însoțită de o creștere bruscă a pragului de durere. Lipsa stimulării antigenice care duce la o scădere treptată a pragului de durere, care, cu toate acestea, nici o dovada a imunogeneza active. Aceste rezultate sunt reprezentate grafic în Figura 21.
Astfel, considerăm că reactivitatea nociceptivă oportun recomanda monitorizarea procesului operațional hiperimunizarea de control.

Fig. 21. Dinamica reactivitate nociceptive la iepuri conform cu UONRO în timpul hiperimunizarea cu încărcătură medie antigenic
Pe baza relației identificate, am încercat să aplicăm abordarea recomandată pentru dezvoltarea de scheme de imunizare folosind antigene cu necunoscute imunogenității. Necesitatea de a rezolva această problemă a apărut în legătură cu începerea lucrărilor în Volgogradsky ciumei Institutul de Cercetare pentru obținerea antiseruri titrazhnosti ridicat la legioneloză patogen, nu este utilizat anterior ca un antigen la iepuri.
Modul tradițional de a dezvolta scheme de imunizare bazat pe selecția empirică a unor doze de antigen care provoacă relativ crescut sinteza de anticorpi specifici. Pe de o parte, doza de antigen trebuie să fie suficientă pentru a stimula un celule ale sistemului imunitar active și organe, iar pe de altă parte - nu trebuie să provoace suprimarea imunogeneza.
Studiile au fost efectuate pe 20 de iepuri, distribuit anterior în trei grupe în funcție de UONRO (7 - ridicat 6 - 7 cu o valoare medie și - scăzut). imunizare a început
Pre-testarea antigenului destinat minimă doză imunogenică (1,0 miliarde de microni. Cl.), În trei iepuri cu UONRO ridicată. Antigen (celula inactivat L. philadelphia) a fost injectat intradermic în 10 puncte în amestec cu FCA. În fiecare zi, deoarece injectarea la animale produce identificarea individuală și de înregistrare a stării de adaptare PBCH a corpului. Am constatat că, în primele zile după imunizarea sensibilității cobailor durere a scăzut, în medie, cu 70% față de valorile inițiale. În același timp, valorile indicilor de adaptare vorbitor arată absența modificărilor patologice ale stării de adaptare a organismului, care se presupune a fi factor care acționează pentru dezvoltarea răspunsurilor generale de protecție. Fenomenele observate au permis să se stabilească caracterul adecvat al dozei alese de expunere la antigen la minimul necesar, să fie capabil să ruleze mecanisme pentru homeostazia responsabile de formarea unui răspuns imun specific. Pe baza acestei generale a început Hyperimmunisation toți iepurii, pe baza schemei de administrare convențională a antigenului. În acest caz, intervalul dintre injecții a fost de 7 zile, ceea ce corespunde perioadei de adaptare fiziologic condițional. O altă doză de antigen comparativ cu cele anterioare, a fost crescut în jumătate (1, 2, și așa mai departe. D. N. Cl.). In timpul experimentului au continuat să controleze în mod individual rata de adaptare și PBCH. Animalele au fost scoase din experiență când următoarea doză de antigen, determinând dezvoltarea de stres cronic.
Experimentul a stabilit că animalul cu o doză mare de antigen maximă UONRO a fost de 4,0 miliarde de microni. Cl. O creștere suplimentară a sarcinii antigenic cauzate formarea stresului cronic și pierderea fiecărui al doilea iepure. Mai mult decât atât, pe scurt, în timpul zilei, reducerea sensibilității durerii a coincis cu dezvoltarea de stres acut, și a condus la o ușoară creștere a reactivității ulterioare nociceptiv (10%), în raport cu valorile inițiale și starea de schimbare adaptivă în direcția activării. Persistentă post-vaccinare sensibilitate scăderea durerii este întotdeauna însoțită de dezvoltarea de stres cronic (Fig. 22).

Fig. 22. Dinamica indicelui de adaptare și reactivitate nociceptive la iepuri cu hiperimunizarea ridicat UONRO cu celule inactivate
Aceste relații au fost trasate în celelalte grupuri experimentale. Odată cu scăderea labilității UONRO a redus dinamica ca PBCH valorile și valorile parametrilor adaptive. Astfel, animalele cu o medie UONRO mentinut cu succes doza de antigen 8,0 miliarde de microni. Cl. Iepuri mici UONRO au fost capabili să se adapteze la creșterea sarcinii antigenic singur până la 16,0 miliarde de microni. Cl.
Pentru un imunogeneza standard de contabilitate ca o perioadă de control determinarea titrurilor de anticorpi alese a opta zi după a patra injecție (8,0 miliarde de microni. Cl.), Deoarece aceasta corespunde antigenele convenționale ciclu hiperimunizare bacteriene. Determinarea anticorpilor serici a fost realizată în RIA. Valorile medii aritmetice ale titrurilor de anticorpi (M + m) realizate în grupuri cu înaltă UONRO 4,0 + 2,32, cu o valoare medie - 12,40 și 42,7 + scăzut - 13,3 + 3.10. Analiza statistică a capacității producătoare de anticorpi a animalelor, realizate de Montsevichyute-Eringene a relevat cantități semnificative avantajul de a titrurilor de anticorpi obținute în grupul cu o medie indivizii UONRO relative cu UONRO ridicată (p < 0,05), и аналогичную тенденцию относительно особей, характеризующихся низким УОНРО (р < 0,1). Учитывая численное популяционное преимущество индивидов, обладающих средним УОНРО, логичным будет заключение о целесообразности определения оптимальной антигенной нагрузки именно к данной группе животных.
Astfel, rezumând rezultatele studiului sugerează următoarea secvență de determinare a dozei optime a materialului antigenic la schemele de dezvoltare hiperimunizare:

1. diferențierea animalelor experimentale UONRO;
2. determinarea dozei minime de antigen care provoacă pe termen scurt (până la zile) scad PBCH, la animale cu UONRO ridicată;
3. identificarea sarcinii maxime antigenic fără a provoca cronice (pana la saptamani) reducerea reactivității nociceptive la persoanele care au o UONRO medie, secvențial (la intervale săptămânale) a creștere de două ori doza minimă de antigen la valoarea maximă admisă.

În plus, pentru a confirma legitățile generale biologice interrelații efectuate studii utilizând antigene de origine eucariote revelate. În acest caz, precum și Biomodel iepuri utilizate (20
animale), criterii preselectate pentru standardizare comune și distribuite în mod aleatoriu în mod egal în două grupuri de tratament. Imunizarea a fost efectuat un grup de oxiuri gluga Passalurus ambiguus, și o alta - BSA. Dozele au corespuns antigene unice de sarcină maximă adecvată anterior calculate empiric pentru o anumită populație de animale. Doza optimă a unui extract imunogen din oxiuri a fost de 36 ug proteină și BSA - 8 mg de proteină per 1 kg greutate corporală de iepure. Antigenele administrat o dată subcutanat. În ziua 10 și recoltarea de sânge a fost realizată prin ELISA detectat niveluri de anticorpi specifici în ser. Zilnic pe tot parcursul experimentului, animalele au fost determinate valori ale indicatorilor de stat de adaptare și reactivitate nociceptivă.
Ca rezultat al cercetării am stabilit uniformitatea dinamicii parametrilor studiați de imunizare cu antigene diferite origine eucariotă (Fig. 23).
Când acest animal a fost formarea de răspuns de grad înalt primar umoral imun atât în ​​oxiuri impact (titru AT - 1100.0 + 208,2) și efectul BSA (titru AT - 1133.3 + 261.5).
Datele obținute permit să se concluzioneze că absența oricăror caracteristici adaptive homeostaza atunci când sunt expuse la material antigenic organism de natură diferită, indicând fezabilitatea monitorizării reactivității nociceptive ca o evaluare universală a testului răspunsului imun.

PBCH - prag de durere AP - indicele de adaptare (% limfocite: neutrofile segmengoyadernyh%)

Timpul de administrare de desen antigenovVozdeystvie oxiurilor Impact BSA

Fig. 23. Parametrii Adaptabil la iepuri, atunci când se administrează la un organism diferite antigene de origine eucariotă