Caracteristici ale dezvoltării reacțiilor specifice în unele efecte toxice și farmacologici - nivelul de reactivitate totală nespecifică a organismului

CAPITOLUL 4
CARACTERISTICI SPECIFICE reacțiilor în unele efecte toxice și farmacologici FUNCȚIE UONRO
De bază, obligatorie și cea mai mare parte a volumului studiilor toxicologice și farmacologice referitoare la studiul interacțiunii materiei și a organismelor vii, este de a efectua experimente pe animale [Batrak GE, A. Kudrin, 1979]. Activitatea farmacologică a substanțelor de testat este de obicei caracterizat prin categorii cantitative și calitative ale reacțiilor organismului la introducerea lor. Astfel, de regulă, să ia în considerare speciile, caracteristicile de vârstă și sex ale animalelor utilizate în studiile toxicologice și farmacologice [Berezovskaja IV ZF Loskutova 1993- 1980]. Unii autori sugerează în continuare să ia în considerare starea fiziologică a animalelor experimentale (stadiul ciclului sexual, regimuri alimentare), microbiologice și statutul lor genetice, sezonier, timp de experimente de zi performante, presupunând că numai prezența acestor informații pot fi văzute pe reproductibilitatea și comparabilitatea rezultatelor [Berezkin M .in., 1989].
În ciuda importanței neîndoielnică a condițiilor discutate pentru a furniza experimente toxicologice și farmacologice, o serie de factori care ar putea avea un impact semnificativ asupra rezultatelor experimentelor, rămâne inventar. Pe sensibilitatea diferită a oamenilor individuali și animale pentru aceleași substanțe cu doze administrate și obținerea unor efecte uniforme în persoane diferite, la doze care diferă de mai multe ori, a fost mult timp cunoscut [răcelile LE, Lilin Ye, 1980]. Cu toate acestea, chiar și astăzi reglementarea acestor studii nu oferă o diferențiere suplimentară a animalelor experimentale la nivelul de reactivitate generală [Berezovskaja IV, 1993]. Ignorarea acestui fapt împiedică selectarea corectă a reacționa în mod adecvat grupe de animale, dozele de referință de identificare ale substanțelor de testat, evaluarea obiectivă a răspunsurilor și concluzii finale, prin urmare, fiabile lucrări experimentale.

1. Manifestare de toxicitate acută și subacută, în funcție de UONRO

Studiile toxicologice sunt efectuate pentru a identifica efectele adverse ale substanțelor chimice și agenți biologici asupra organismelor vii. Vaccin și producția de ser necesită Biologics de control specifice folosind toxine bacteriene având o activitate predeterminată. In general, se presupune definiția toxicității acute și subacute, identificarea letale, și au tolerat doze activ. Pentru a asigura conformitatea cu efect toxicologic standard este paramount specimenelor reactive maxime de selecție același tip în experimentale si grupurile de control. Având în vedere UONRO integratoare a identificat și capacitatea de a influența acest indicator de gravitatea răspunsurilor toxicologice care le-am efectuat cercetări relevante.
Prima experiență a fost efectuat pe 30 de hamsteri de aur, simulate efecte chimice toxice acute folosind iod (Iodum). Animalele au fost pre-diferențiate pentru UONRO, formând trei grupuri experimentale de câte 10 animale fiecare. Iodul este administrat simultan la toate animalele testate subcutanat o dată la o doză de 720 mg / kg (DCL) într-o soluție de alcool de 10%. Apoi, la fiecare oră în timpul zilei, pentru a efectua înregistrări individuale ale animalelor moarte.
Experimentul a stabilit o anumită dependență de durata de viață a animalelor UONRO. Durata medie a vieții persoanelor cu înaltă UONRO a fost de 7,8 ± 2,6 ore cu o valoare medie - 10,5 + 2,96 și joasă - 12,4 + 2,84.
Analiza statistică a rezultatelor, formate prin Montsevichyute-Eringene a arătat o tendință de a semnificației diferențelor între durata de hamsteri în grupuri de animale cu UONRO înaltă și joasă (p < 0,25).
Al doilea experiment a fost efectuat pe 18 șobolani albi anterior distribuite uniform în cele trei grupuri de tratament în ceea ce privește UONRO. Efectele toxice acute au fost simulate prin administrarea intraperitoneală a tuturor endotoxinei animale testate Salmonella (Salmonella typhimurium) într-o singură doză de 15 mg / kg (LD95). Apoi, la fiecare oră în timpul zilei, pentru a efectua înregistrări individuale ale animalelor moarte.
Ca rezultat al experimentului a fost dependenta de durata de viață a șobolanilor experimentale prin UONRO. Momentul morții animalelor cu UONRO ridicată, a fost de 13,3 + 2.37 oră. Pentru șobolanii albi, UONRO medie diferite, a fost de 16,3 + 2,74 ore. Termenul animale moarte scazut UONRO egalat 19,2 + 2.24 oră, cu doi indivizi din acest grup au fost încă în viață (fig. 12).

Fig. 12. Dinamica distrugerii șobolanilor albi sub acțiunea endotoxinelor LD95 Salmonella în funcție de UONRO
Analiza statistică a rezultatelor, efectuat cu ajutorul unui test Wilcoxon - Mann - Whitney a relevat semnificația diferențelor temporale moartea animalelor experimentale care aparțin grupelor de UONRO extreme (p < 0,05).
Al treilea experiment a fost efectuat pe 48 de cobai, anterior distribuite uniform în cele trei grupuri de tratament în ceea ce privește UONRO. Pentru a simula efectele toxice acute ale endotoxinei, de asemenea, utilizat S. typhimurium, introducerea ei în același timp, toate animalele de test intraperitoneal în DCL. De-a lungul a doua zi efectuate la fiecare oră înregistrări individuale ale animalelor moarte.
Studiul a stabilit dependența animalelor experimentale rezistente la efectele toxice aduse de UONRO individuale. Astfel, longevitatea cobailor după administrarea toxinei realizate în grupuri cu înaltă UONRO - 13,8 + 1,79 ore, cu o valoare medie - 14,6 + 1.51 oră și UONRO scăzută - 17,6 + 1,73 ore ( Fig. 13).

Fig. 13. Dinamica moartea cobailor expuse la Salmonella endotoxinei DCL în funcție de UONRO
prelucrarea datelor statistice efectuate de Montsevichyute-Eringene, a relevat o tendință spre semnificație a diferențelor în speranța de viață între grupuri de animale cu UONRO de înaltă și joasă (p < 0,25). Таким образом, обобщив экспериментальные данные, можно сделать заключение о влиянии УОНРО на индивидуальную устойчивость к острому токсическому воздействию, независимо от природы токсина. Причем наибольшей устойчивостью отличаются особи с низким УОНРО, а наименьшей — с высоким УОНРО. Индивиды, обладающие средним УОНРО, характеризуются промежуточным положением в устойчивости к токсинам между крайними группами животных, фактически отражая среднепопуляционный токсикологический эффект.
În plus față de controlul toxicității acute, în practica studiilor toxicologice sunt utilizate pe scară largă evaluarea toxicității subacute. Gradul de toxicitate se determină prin reacția organismului severitate la introducerea substanței având o valoare negativă pentru el [Batrak GE, Kudrin AN 1979].
Evaluarea toxicității subacute de toxine microbiene cel mai frecvent efectuate de rezultatele „testului de băut“. Metoda de investigare se bazează pe manifestarea acțiunii toxinelor bacteriene, determinând scăderea greutății corporale bioprobnyh animale. Ca soareci Biomodel utilizate. Imediat înainte de administrarea medicamentului este determinată greutatea corporală a grupurilor experimentale și de control ale animalelor. medicația de studiu este administrat intraperitoneal si a observat timp de o săptămână pentru schimbări dinamice în masa grupului experimental de șoareci. Cu cât decalajul de greutate în viu în șoarecii din grupul experimental de animale din grupul de control, mai pronunțat studiu de toxicitate de droguri.
Având în vedere impactul UONRO rezistența organismului la efectele toxice acute, am emis ipoteza că reacția la subacută efecte toxice într-un fel sau altul va depinde de UONRO individuale.
Pentru a studia dependența de modificarea greutății corporale a animalelor bioprobnyh UONRO în subacute efectele toxice ale studiilor relevante finalizate.
Lucrarea a fost efectuat pe 60 de șoareci albi potrivite pentru varsta (55-65 zile) și greutatea corporală (17,0-19,0 ​​g). În plus, animalele au fost diferențiate UONRO bazate și distribuite în mod egal în trei grupuri. În grupul I include persoane cu un nivel ridicat, în lotul II - cu o medie, iar în lotul III - scăzut UONRO. Fiecare grup de șoareci este împărțit în două grupe, experimentale și de control, 10 animale. Formarea subgrupe a fost efectuată timp de 6 zile înainte de experiment (perioadă de adaptare recomandată). Pe parcursul acestei perioade, greutatea medie a grupului I animale au scăzut cu 0,1 g, masa șoarecilor grupa II au rămas neschimbate, iar în grupul III a crescut cu 1,5 g în ziua 7 toate animalele cu experienta subgrupele DMD simultan administrate intraperitoneal (10 mg / kg) exotoxină stafilococice (S. aureus). În același timp, toți șoarecii de control au fost injectați în mod similar subgrupuri volum corespunzător de soluție salină. Apoi, zilnic, pentru următoarele 7 zile au fost cântărite în fiecare subgrup de animale.
Experimentele au identificat anumite caracteristici ale dinamicii o greutate în viu a șoarecilor subgrupelor experimentale și de control în funcție de UONRO.
Deoarece animalele injecțiilor experimentale subgrupe în masă I la al doilea grup a scăzut de zile o medie de 1,5 g, apoi menținut la același nivel, în a patra zi a început să crească, și până la sfârșitul deficitului săptămâna medie de 0,5 g de nivelul inițial. șoarecii Corporală experimentat grupa subgrupe II în timpul experimentului a crescut cu o medie de 1,2 g, și Grupul III - 1,5 g (fig. 14).
In toate subgrupurile de control au prezentat o creștere constantă a masei animalelor. Masa grupării șoarecilor I depășit nivelul inițial de 0,5 g, și grupele II și III, practic, a coincis cu valorile corespunzătoare ale subgrupelor experimentale.
Astfel determinat că animalele sunt caracterizate prin UONRO ridicată diferă în sensibilitate crescută la subacut efecte toxice, determinate de „băutul eșantionului.“

Fig. 14. Dinamica modificărilor șoareci albi în greutate în viu distribuite UONRO înainte și după expunerea la exotoxine stafilococică DMD plus față de utilizarea „test de baut“ pentru a evalua toxicitatea subacută analiză frecvent utilizată a modificărilor morfologice caracteristice proceselor patologice induse de efecte toxice.
Pentru a studia efectul schimbării UONRO greutatea organelor interne în subacută efecte toxice finalizate următoarele studii.
Ca Biomodel utilizat 36 cobai. Animalele cu UONRO individuale distribuite în mod egal în trei grupuri. Fiecare dintre grupurile suplimentare, randomizat, divizat în subgrupuri experimentale și de control 6 exemplare. Subacute efecte toxice modelate de trei ori, intervale orare, injecție intraperitoneală MTD (0,5 mg / kg) endotoxina Salmonella (S. typhimurium) animalele din subgrupe experimentale. Simultan, controlul cobailor injectat subgrupuri volum de soluție salină corespunzătoare prin același program. După 10 de ceas este eutanasiere simultan toate animalele experimentale prin decapitare. Efectuarea unei autopsie, a scos ficatul, plămânii, inima, splina, rinichi si nadpochech-
ciupiturile. În plus, corpurile recuperate au fost cântărite și calculate fracția masa lor individual.
Experimentele au stabilit anumită tendință de a schimba masele relative ale unora dintre organele interne în efecte toxice subacute (Tabelul 17)..
Tabelul 17
Variația greutății relative a organelor interne la cobai, conform UONRO sub influența Salmonella endotoxina IPOA

* O schimbare semnificativă statistic (p < 0,05) по критерию Вилкоксона — Манна — Уитни.
În același timp, datorită valorilor ridicate ale erorilor statistice calculate indicele mediu de modificări semnificative în greutatea relativă a organelor interne, cu excepția glandele suprarenale, nu este dezvăluit. Cu toate acestea, rezultatele obținute ne permit să afirmăm că mai mari schimbări morfologice ale organelor interne, caracteristice intoxicației, sunt UONRO deosebit de redus.
Aceste estimări de toxicitate subacută rezultate optimizate în mare parte datorită selecție scop biomodels un UONRO predeterminat. Cu toate acestea, determinarea dozelor prag de substanțe toxice este problematică din cauza lipsei unor metode de evaluare calitativă a indicatorului.
Presupunând că femeile cu sistem reproductiv ridicat UONRO ar fi relativ mai sensibile la pragul de intoxicare, ne-am făcut studii să se bazeze pe identificarea unor indicatori calitativi pentru a măsura efectele toxice ale DMD. Lucrarea a fost realizată pe un mytah alb - formă de animale care au un ciclu de tip poliestralny sexual cu ovulație spontană. Total 198 utilizat în șoarecii de experiment (162 + 36), diferențiate anterior bazate pe UONRO și distribuite în mod egal în trei grupuri. Grupul I a inclus o specie cu UONRO ridicată, II - mijloc și III - scăzut. Fiecare grup a constat din trei subgrupuri egale, două probe (A și B) și un control. Fiecare subgrup, la rândul său a fost recrutat din două familii (6 + 2) și un unisex (6) Minigrup. Toate familie experimental subgrupurile A-formate direct după injectarea subcutanată în endotoxina Salmonella femeie calculată DMD (0,4 mg / kg în ml de 0,9% soluție 0,2 tărie NaCl). Toate familiile cu experiență în subgrupurile au fost formate în ziua a 7-a după efecte toxice similare.
Animalele au fost expuse la efectele toxice de același sex Minigrup în același timp cu femelele subgrupurilor, pentru a ține seama de posibilul impact asupra timpului de injectare, sensibilitatea organismului la endotoxină. Toate femeile controlează subgrupe în familii, iar mini-grupurile au fost supuse efectelor placebo (0,9% soluție NaCl th). Formarea familiilor cu experiență (A și B) și de control sub-grupuri ale tuturor grupurilor a fost realizată în același timp, prin variația duratei de administrare a toxinei. In ziua a 14 din momentul constituirii familiilor tuturor femeilor primul control și subgrupe experimentale A și sedat cu eter și a marcat prin dislocare cervicală. Apoi a făcut o autopsie, îndepărtarea uterului și după deschiderea coarne au identificat mortalitatea embrionară. Toate femeile de al doilea control și subgrupuri experimentale A și B din anii 20 a 30-a zi de la formarea de familii înregistrate zilnic apariția puilor.
În timpul experimentului, toate de sex feminin Minigrup același sex a produs înregistrările zilnice ale unui ciclu sexual.
Ca urmare a cercetărilor efectuate următoarele puncte de set de bază.
La 70% dintre femeile din grupa I experimentat mini-grupuri din subgrupurile A și B timp de 4-6 zile după efectele toxice dezvoltate anafrodiziya (incetarea ciclurilor sexuale). La 50% dintre animalele din lotul III experimentat mini-grupuri în subgrupe A și B, în aceeași perioadă a existat activarea sferei de reproducere (ovulație în absența masculi).
În primul test A-subgrup grupa I la femele la deschiderea uterului a relevat absența completă a embrionilor. In subgrupuri similare ale grupurilor II și III observate în plină dezvoltare a sarcinii (Tabel. 18).

Indicatori de deces fetale la șoareci albi, femele, in functie de UONRO atunci când sunt expuse DMD Salmonella endotoxină

În comparație cu animalele de control primele subgrupe ale grupelor de mortalitate embrionară în experimentale A-subgrupe, cu excepția grupei I, nu a avut modificări semnificative ale valorilor parametrilor studiați. Mai mult decât atât la animalele din lotul experimental III-A supravietuire subgrup de embrioni implantați depășit în animalele de control al subgrupelor.
Valorile ratelor mortalității fetale la animale în primele subgrupe experimentale ale grupurilor aproape complet a coincis cu valorile corespunzătoare din subgrupele de control.
Valorile parametrilor de reproducere din fiecare grup nu au avut diferențe semnificative la animalele din al doilea pilot și a doua subgrupuri-experimentate.
Apariția descendenților în al doilea A-subgrup al Grupului I în datele țintă au fost înregistrate. Valorile parametrilor de reproducție în a doua subgrupe experimentale A-II și III corespund acelorași grupe de valorile obținute în același tip de subgrupuri de control.
Astfel, impactul DMD endotoxinei microbiene, exercitând un efect inhibitor asupra activității funcționale a sistemului reproductiv al șoarecilor albi femele, caracterizate printr-un înalt UONRO activează simultan sistemul sexual al indivizilor care au un UONRO scăzut. inhibiția vârf tranzitorie a funcției de reproducere a animalelor cu ridicată UONRO cade în a 5-a zi după o singură expunere toxică, iar recuperarea completă are loc în ziua a 8-a.
relațiilor identificate ne permit să oferim o nouă indicatori calitativi de măsurare a substanțelor toxice de origine bacteriană DMD.

Datele experimentale de cercetare, este posibil să se concluzioneze că un impact clar asupra manifestărilor UONRO specifice de toxicitate acută și subacută la animalele de laborator. Mai mult decât atât, efectuarea unei evaluări a toxicității subacute a diferitelor substanțe, este necesar să se țină seama de aspectele specifice ale dezvoltării diferitelor reacții patologice în funcție de UONRO individuale.