Metodele histochimice combinate (pentru polizaharide și proteide) - baza histologiei

Avantajele metodei - detectarea o felie de două componente chimice diferite de proteine ​​si natura polizaharid.

O metodă combinată de identificare polizaharide (pentru Ritter - Olessonu)

(Formalina oarba formol 10% în 90% spirte- umple în parafină)
Este o combinație a celor două metode - reacție SHIK- și metoda Gale, care permite detectarea într-una și aceeași secțiune și mucopolizaharide acide mukoproteidov.
Metoda. 1. Secțiunile au fost deparafinate și aduse în apă.

1. Procedeu conform metodei înainte și Gal sunt nuclei colorați dețin reacția Schick, apoi clătite cu apă distilată.
2. Deshidrata, să lumineze, să încheie în balsam. Rezultat. mucopolizaharide acide vopsit albastru, mukoproteidov - în roșu purpuriu.

O metodă combinată de proteine ​​de identificare și polizaharide neutre

(Broaste - Carnoy, formol 10%)
Aplicarea acestei metode permite detectarea simultană a proteinelor în secțiuni și polizaharide neutre și reflectă în mod ideal, organizarea structurală a produsului chimic și microstructuri studiat.
Esența metodei constă în faptul că Procion asociat cu anumite resturi de aminoacizi ale proteinei, și reacția Schick pătează polizaharide neutre.
soluţii de lucru
Reactiv Schiff (vezi metoda de preparare. P. 270). apă acru (vezi metoda de preparare. S.270). Soluție periodat: 250 mg de potasiu dizolvat în 100 fi stabile ml apă distilată caldă.
Soluție Procyon albastru (de Ivanov VB): 100 mg tampon fosfat pH 5,6.
metoda de colorare (secțiuni de parafină)

1. Adu-secțiuni la apă.
2. Pune timp de 10 minute în periodat de potasiu.
3. Se clătește în două porțiuni de apă distilată.
4. Pune în reactivul Schiff timp de 20 min.
5. Se spală în trei porțiuni de apă sulfuroasă timp de 3 minute fiecare.
6. Se clătește cu apă curentă timp de 30 minute.
7. Se clătește în apă distilată și se transferă la o soluție de 0,1% Procyon timp de 40 min la 50 ° C
8. Se clătește în două porțiuni de apă distilată.
9. Deshidrata, să lumineze, să încheie în balsam. Rezultat. Structura ce conține proteine, vopsite în albastru strălucitor, și hidrați de carbon - în roșu aprins.