Metoda Bezynektsionny de studiu vascular. V. Kupriyanov - baza histologie

Metoda Bezynektsionny pentru studiul vasului V. Kuprianov (impregnare cu nitrat de argint)
Această metodă face posibilă nu numai pentru a identifica rețeaua vasculară, dar, de asemenea, pentru a determina structura peretelui și vaselor de sânge vasculare care aparțin unei anumite legături în microvasculature precum și relația dintre vasele cu țesuturile înconjurătoare.
Înainte de impregnare, materialul de studiat au fost fixate în 12% soluție de formalină neutră (țesuturi animale - nu mai puțin de 7 zile, țesuturi umane - nu mai puțin de 14 zile).
secțiuni au fost preparate pe o înghețare microtomice bucăți de țesătură (20 microni sau mai mult, în funcție de obiectivele studiului).
Materialul de film, format din filme subtiri (peritoneu, etc.) impregnate cu întregul (total).
peliculă groasă exfoliat anterior sub un microscop binocular cu ochi folosind bisturiu și forcepsul.
Pregătirea feluri de mâncare - cm .. 145.

soluţii de lucru

O soluție de 12% soluție de formalină neutră obișnuit (acid) formalină 1%
O soluție de normal (acid) 0,5% formalină (formol Toate soluțiile pot fi preparate în avans, deoarece ele pot rezista la depozitare pe termen lung.)
Soluție de nitrat de argint de 20% (a se vedea de preparare și condițiile de depozitare. s.249).
O soluție de argint amin (preparat în porțiuni mici, în mod direct într-o locație obiect, vezi. S.249).
Apă de amoniac - soluție apoasă de amoniac 25% (poate fi preparat înainte de impregnare și păstrate într-un recipient închis ermetic) - diluat cu apă distilată 1: 1.
Alcool 60%.
Apă distilată.
Apa de la robinet pentru a îndepărta clorurilor (trebuie să se stabilească în vasul timp de cel puțin 1 zi).
Numărul de soluții determinate de volumul lucrării.

tehnica de impregnare

1. Se spală în apă curgătoare timp de 2 ore, urmată de spălarea de două ori în apă distilată.
2. Pune în alcool 60% timp de 30 minute, urmată de clătire de două ori în apă distilată.
3. Se transferă o soluție de azotat de argint de 20% timp de 1 oră (în mod necesar în întuneric!) Într-un termostat la 37 ° C (în absența unui termostat înveliți nava în hârtie neagră și pus sub o lampă de birou).
4. Se clătește în apă distilată timp de 3 minute.
5. Prin patru ceașcă cu formalină 1% acid (în cazul în care soluția în al patrulea pahar încă opalescent, este necesar să se continue deținerea transparența totală din urmă porțiune).
6. hârtie de filtru uscată.
7. Pune în soluție de argint amin timp de 2-3 minute.
8. Se transferă obiectul în acid formalină 0,5% (încălzit la temperatura camerei) și mențineți până când culoarea galben-brun.
9. Se clătește în 25% soluție de amoniac 3-5 min.
10. Se clătește cu apă distilată până la dispariția miros de amoniac.
11. Prin alcoolii bateriei de creștere a concentrației (70%, 80%, 96% I, 96% II), carbol-xilen și închise în balsamul.

Rezultat: Structura impregniruemye vopsit maro.