Bacteriile pertussis si paraklyusha - microbiologie cu tehnica testelor microbiologice

Una dintre cele mai frecvente infectii din copilarie este tuse convulsivă. Agentul etiologic al bolii a fost gasit in 1906 Bordeaux si Gengou in sputa pacientilor cu pertussis si numita Bordetella pertussis (Fig. 75).
Morfologia și proprietățile tinctoriale. tije scurte cu capete rotunjite au o lungime de 0,5 până la 2 microni și o grosime de 0,2-0,5 microni. Cu toate acestea, nu formează spori, gramotritsatelny- unele tulpini produc capsule.
Proprietățile culturale și biochimice. Cea mai bună creștere a fost observată la o temperatură de 35-37 ° - anaerob facultativa. Prima generație necesită prezența sângelui în mediu. bacterii pertussis pentru cultivare se aplică glicerină cartof agar cu sânge propus Bordet și Gengou, agar lactic din sânge și cazeină agar-carbon (AMC).

Fig. 75. Sticks pertussis. Frotiu din cultură.

1. Miercuri Bordet-Zhang. Pentru prepararea glicerinei - cartof agar cu sânge de 100 g de cartofi fin tocat cu 200 ml dintr-o soluție apoasă 4% de glicerol se fierbe într-o autoclavă, lăsat să se liniștească și lichidul se decantează din precipitat. 50 ml din acest lichid se adaugă 1 150 ml de soluție salină fiziologică și 5 g de zdrobit și se spală agar-agar se dizolvă, se toarnă în eprubete și sterilizate. Înainte de utilizare, agarul dizolvată este răcită la temperatura de 45 ° și la acesta se adaugă o parte egală de iepure defibrinat sau sânge uman, încălzit la 40-45 °. agar cu sânge a fost lăsat să se răcească într-o poziție înclinată și turnat în ceașcă.
2. agar-sânge de lapte. Pentru prepararea agar lapte din sânge recomandat topi agar 5% apos conținând 1% clorură de sodiu și se amestecă în cantități egale cu încălzit lapte degresat, apoi în 40 de minute de gătit într-o autoclavă la 0,5 atm (în acest moment, coagularea laptelui). Amestecul fierbinte a fost filtrat printr-un strat de tifon din bumbac, se toarnă uniform în sticle și re-sterilizate într-o autoclavă timp de 20 min, la 0,5 atm. Apoi ostuzhennoy la 45-50 ° agar lapte val 20% sânge de oaie defibrinat. Pentru a suprima mediul microflorei străine pentru a adăuga penicilină într-o cantitate de 5 unități per cupă (20 ml mediu).
3. agar Casein-cărbune (AMC) este preparat după cum urmează. La 1 litru de apă distilată, se iau 20 ml din hidrolizatul de cazeină (preparată prin digestie triptică), 5 g de clorură de sodiu, 0,002 g de clorură de calciu, 0,4 g de carbonat de sodiu, 0,002 g de clorură de magneziu, 0,25 g de sare de dipotasiu fosforic, 1 g solubil amidon și 20 g de agar-agar. Mediul a fost fiert, ca agar convențional, pH ajustat 7,2, îmbuteliat și sterilizate într-o autoclavă la 0,5 atmosfere timp de 30 minute. Înainte de utilizare în mediu topit și ostuzhennoy se adaugă 0,2% din cărbune activat și extract de drojdie 3%.

Coloniile pertussis bastoane mici, ridicate, hemoliza perlate cu o zonă (fig. 76). Cu o creștere în continuare cultivarea devine mai dur și luxuriantă. bacterii pertussis nu fermentează zaharuri nu formează indol, nu restabiliți nitriții.
Rezistența. Bordetella pertussis stabilitate redusă, ucis rapid prin fierbere și acțiunea dezinfectanților. Unei pertussis rece coli mai puțin sensibilă.
Patogenitatea la animale și la formarea de toxine. Pertussis coli patogene pentru șoareci albi, iepuri și cobai. animale experimentale când sunt administrate pentru a le doze mari de ambele culturi moarte de viață și mor sub influența endotoxină eliberată în timpul distrugerii celulelor microbiene. Pentru studiul bețișoare de toxină pertussis folosit iepuri albinoși. Atunci când se administrează intradermic ei cultura microb după 18-24 ore la hemoragia formată locul injectării cu necroza ulterioară a pielii.
În ultimii ani, ea a reușit să obțină o substanță de tip exotoxina toxice, care, atunci când este administrat la șoareci albi, determinând acumularea de antitoxina.
Sursa de infecție sunt, în principal, în stadiul de copii catarală bolii, dispersarea bacteriile din picăturile de mucus prin tuse. Boala se transmite prin picături din aer. Atrium este mucoasa tractului respirator superior. Microbii sunt localizate la nivelul mucoasei cailor respiratorii si in plamani, dar în procesul bolii datorită acțiunii toxinelor implicate întregul corp.
Perioada de incubație este de 3-11 zile.
Boala poate fi împărțită în trei perioade: 1) Perioada catarală caracterizată printr-o ușoară creștere a temperaturii, dureri de cap, tuse și durata nasmorkom- perioadei de 5 până la 11 zile-2) perioada convulsiv - în această perioadă un copil pacient care suferă un atac de tuse dureroase. În timpul atacului, fata lui devine umflata, cianotic, ochi numărul vypyachivayutsya- tuse convulsivă, în cazuri severe, poate ajunge la 30 sutki- 3) Perioada de razresheniya- diferă de perioada precedentă care tusea sunt tot mai rare, iar pacientii mai bine tolerat, în cele din urmă, trebuie doar să se oprească.
Patogeneza pertussis este actiunea de endotoxine bețele pertussis pe fibrele nervoase vagale pe care excitație este transmis centrului respirator. Diverse complicații, care pot apărea în tuse convulsivă, unii cercetători atribut, ca urmare a alergie infecțioase.
Foarte similar cu tuse convulsivă tablou clinic al bolii este parakoklyushnaya coli (Bordetella parapertussis). Copiii care au avut pertussis poate dezvolta parakoklyushem.
Conform proprietăților morfologice, tinctoriale, culturale și antigenice parakoklyushnaya baghetă similară cu pertussis. Aceasta diferă numai în natura creșterii unor medii nutritive și capacitatea de a fermenta ureei (tab. 11).
Tabelul 11
Principalele caracteristici distinctive ale bacterii pertussis și parakoklyusha

Imunitatea. concediile medicale anterioare cu o durată de imunitate antimicrobiană. În serul pacienților și convalescenți descoperit aglutinele și complement de fixare anticorp.
Diagnosticul microbiologic. Material pentru examenul de laborator este de spută, de multe ori - mucus de la nivelul nasului, gâtului și laringelui, obținute prin „Plăcile de tuse.“ Izolarea culturii oarecum îngreunată de faptul că în gât copiilor bolnavi, există mulți microbi saprofite, prevenind cultivarea bețișoare pertussis. Prin urmare, o mai avantajoasă pentru a lua materialul de testare din partea de jos a tampon nasofaringiene speciale (tampon de bumbac adâncime). În plus, tusea pacientul poate fi absent pentru o lungă perioadă de timp, la momentul materialului de captare.

Ia materialul nu trebuie să atingă marginea exterioară a tubului, precum și limba mucoase, obraji si pielea la microflorei străine nu a luat pe tampon.

Fig. 76. Coloniile pertussis bacilul pe un mediu de AMC.
Metoda Material gard cu tampoanele crește semnificativ procentul inocularea pertussis coli.
Luate de materialul pacientului prin „plăci de tuse“ sau tampon inoculate pe suporturi speciale nutritiv: agar glicerină-cartof Bordeaux, agar cu sânge lăptoasă sau agar cazeină-cărbune (AMC).
Pentru a suprima creșterea microflorei străine, prevenind stick-uri de reproducere sau parakoklyusha pertussis la agar adăugat timp de 0,5 ore înainte de penicilina inoculare (15-25 unități per 12 ml de mediu), iar mediul este distribuit uniform pe întreaga suprafață. Pentru a asigura o umiditate suficientă necesară pentru reproducere și parakoklyushnyh pertussis bețișoare, pus într-un vas deschis cuptor cu apă. Pe medie Bordet-Gengou pe 2-5-a zi a bacteriei pertussis și parakoklyusha formează un mic tipic, convex, clar definit, lucios, mercurul asemănător picăturilor de colonii (Fig. 76). Lactate, cazeină și sânge-agar colonie cărbune mai mare, alb de culoare, cu un luciu sidefiu.
Dintre coloniile cu trăsăturile caracteristice pentru bacterii sau parakoklyusha pertussis prepara frotiuri, colorate cu colorația Gram și mikroskopiruyut. În prezența preparatelor de tije mici, gram negativi ovoidală da aglutinare microscopice cu seruri pertussis.
ser aglutinant diluat cu soluție salină 1: 100 și glisiera aplicat o picătură de ser diluat și o picătură de soluție salină pentru a controla. O buclă este îndepărtată, o singură colonie de agar-agar și a fost emulsionat într-o cantitate mică de soluție salină. Două până la trei picături din această suspensie au fost amestecate cu pipete individuale ser aglutinant și soluție salină. În cazul în care un rezultat pozitiv al reacției de aglutinare imediat evidentă, în cazuri rare, timp de 5- la 10 minute. Picătura de aglutinare ser fiziologic și nu rămâne lichid de turbiditate uniformă. Parakoklyushnaya baghetă și pertussis aglutinează diluție de ser într-un mic, deoarece bacterii pertussis și parts parakoklyusha antigene comune.
Pentru bacteriile de diferențiere și pertussis parakoklyushnoy din coloniile de pe plăcile pentru a face însămânțări agar înclinat din același mediu nutritiv, care a fost utilizat pentru izolarea agentului cauzal al materialului patologic. Însămânțării pus într-un termostat la 37 ° C timp de o zi. Cultura pură crește parakoklyushnoy coli în 24 de ore, și pertussis numai după 48 de ore. A existat, de asemenea, o schimbare de mediu de cultură în timpul creșterii stick-uri de culoare parakoklyushnoy. carbune-agar Casein colorează în mod difuz culoare burovatokorichnevy și agar Bordeaux și agar lapte din sânge întunece considerabil. Culoare mediu nutritiv nu se schimbă atunci când creșterea a tusei convulsive coli. Pertussis coli pe agar convențională nu este în creștere, stick-uri de creștere parakoklyushnoy însoțite de un mediu de colorare difuză maro. Pentru identificarea finală bețișoare parakoklyushnoy da proba ureazei. Tubul a fost agitat și a pus într-un cuptor timp de 30 minute. Parakoklyushnye bacterie care produce ureazei, ureea este clivat pentru a forma amoniac, care schimbă culoarea mediului pe o culoare roșu zmeură.
diagnosticul serologic al pertussis se bazează pe declarația de aglutinare și de fixare a complementului. Deoarece tusea convulsivă dezvolta alergie, este posibil de a diagnostica un test de alergie pus la 24 de ore după injectarea intradermică a antigenului 0,1 ml pertussis.
Prevenirea specifică. Active de imunizare cu vaccinuri demonstrat eficacitatea sa incontestabilă.
În prezent, practica a introdus mixt pertussis si vaccin difteric si pertussis-difteric-tetanic. Aceste medicamente sunt un amestec format din bacterii pertussis thimerosal ucis, concentrat și difteriei purificat și al doilea vaccin toxoid tetanic (DTP).
Pentru a preveni copii, în contact cu pacientul poate fi administrat 1,5-3 ml globulină umană gamma.
Recomandat pentru tratamentul de antibiotice - streptomicină, tetraciclină, oxitetraciclină și altele.