Principiile de cultivare a microorganismelor - Microbiologie cu tehnica testelor microbiologice

cultivarea SEMNIFICATIVA microorganismelor

1. Semănatul pe cursa înclinată. Brațul drept de a lua o buclă și arde-l pe flacăra fierbinte a arzătorului. Mâna stângă între degetul mare și arătător exploatație agar-agar tub aproape într-o poziție orizontală, astfel încât în ​​timpul însămânțării nu a primit germeni din aer. Răsucirea ușor a lansat un dop de bumbac și degetul mic de la mâna dreaptă, ținând palma, scoateți-l din tub. Marginea tubului este ușor ars. Buclă ia puțin material care conține microbi și mișcări zigzag aplicate pe suprafața de agar in vitro. După însămânțare a produs o buclă este îndepărtată din tuburile de testare, arde marginile și se acoperă cu un dop de bumbac. Apoi, arde din nou bucla în flacăra arzătorului pentru a distruge microbii rămase pe ea.
2. Peres înclinat. Material care conține microbi de asemenea depozitate în tuburi. Pentru a face replantarea un tub la altul, cele două tuburi, adică. E. cel din care plantezi, și unul care este supus însămânțarea, luate împreună și a avut loc între degetul mare și arătător și degetul mijlociu de la mâna stângă. După scoaterea tubului din primul tub prin metoda indicată mai sus, câștigă materialul și transferă materialul pe suprafața unui agar steril, unde inoculată, tuburile au fost apoi marginile coapte și închise (fig. 33).
3. Semănatul pe stoc. Semănatul pe stoc sau bulion pentru a face bulion sau agar-agar precum și însămânțarea pe agar, dar toate manipulările trebuie să fie făcut cu atenție, astfel încât bulionul nu este vărsat din tub sau nu umezită marginile sale. Materialul introdus în bulion pentru semănat se triturează în peretele tubului cel mai apropiat de bulion lichid și agitat. Subcultura din bulion in supa se poate face, de asemenea, cu o pipetă Pasteur sterilă.
4. Semănatul în lapte și alte substanțe nutritive (lichid) mediu este produsă în același mod ca și semințele în bulion.
5. Însămânțarea înțepătură într-un agar coloană sau gelatină. Agar-agar-tub sau gelatina ținute de jos în sus. Materialul de însămânțare ac take platină care injectată perpendicular pe suprafața agarului sau gelatină și avansate de-a lungul axei de țeavă la partea de jos. Acul este apoi recuperat și calcinate dop tub închis (Fig. 34).

În mediul extern și în microbii corpului uman sunt cel mai adesea găsite în combinație cu alți microbi. Pentru a studia proprietățile unui microb (fără de care nu poate fi diagnosticată) trebuie să fie în cultură pură, t. E. Trebuie să fie separate de alte bacterii, cu care este amestecat.

Fig. 33. buclă însămânțare.

Fig. 34. înțepătură de insamantare.

Fig. 35. Pouring plăci de agar.
Există metode pentru izolarea ca urmare a culturilor pure de bacterii:
a) plantarea de miercuri, in cupa Geidenreich - Petri-
b) metode biologice (care aplică mediul de selecție, utilizarea diferitelor temperaturi optime, infectarea animalelor de laborator). Cea mai comună utilizare a materialului în mediul de plantare în cupa Geidenreich - Petri.

1. Echipament însămânțare pentru o ceașcă Geidenreich - feluri de mâncare congelate cu agar. Agar în flacoane, sticle, tuburi, topit într-o baie de apă la fierbere. Apoi agar se răcește la 50-60 ° C și se toarnă în cupe Geidenreich - Petri. Ceștile trebuie să fie sterile. Ele sunt plasate pe o suprafață orizontală, și din vasul conținând agarul topit, dopul este scos, marginea vasului este tras, după care mediul a fost turnat în ceașcă (fig. 35). capac Cupa a ridicat mâna stângă pe de o parte, fără a deschide cupa complet. Înclinați ușor paharul în direcții diferite, este distribuit uniform turnat agar pe fundul. Când agarul se solidifică, cupe plasate într-un termostat cu susul în jos pentru uscare. Este de asemenea util pentru a elimina apa sterila bumbac condens colectat pe capacul paharului. Însămânțarea pe plăci cu agar produs folosind bucla tactil sau frecarea unei spatule de sticlă. Pentru grosimea sa producția necesară de o baghetă de sticlă (4- 5 mm) este introdus în flacăra arzătorului încălzit să se înmoaie, sfârșitul este încrețită și preîncălzite ploskozubtsami formă de triunghi imprimă (Fig. 36). Aproape mai convenabil de a folosi un Drygalski spatula de metal.

buclă de semănat urmează. Platinum câștig bucla mică cantitate de material este ușor de realizat de către suprafața de agar, prin aplicarea unei serii de linii paralele. Material bucla aceeași fără a forma din nou atinge aplicat la a doua și a treia placă cu agar. In prima cupa se poate transforma o creștere solidă, în timp ce a doua și a treia apariția colonii singulare, izolate. Fiecare colonie este un grup separat de microbi similare. Puteți utiliza, de asemenea, o ceașcă, împărțind-o în mai multe sectoare, provocând linia ce desparte fundul de sticlă a paharului.

Fig. 36. Spatulă Drygalski.
Fiecare sector în parte va înlocui o cana. În reseeding ulterioară colonii pe agar înclinat sau alt mediu nutritiv sunt culturi pure.
La semănat spatula pe suprafața de agar se aplică o picătură din materialul de testare în buclă. Apoi, deschiderea cupa si calcinat spatulă de sticlă ostuzhennym se triturează picătură pe suprafață, producând un mișcări stroking lumină pe suprafața de agar (Fig. 37). Fără ardere o spatulă, se însămânțează plăci cu agar doua și a treia.

Fig. 37. Însămânțarea spatulă.

Metode biologice pentru izolarea culturilor pure. Izolarea culturilor pure bazate pe diferite proprietăți biologice ale bacteriilor frecvent transportate pe suporturi speciale nutritiv. De exemplu, suporturile speciale sunt utilizate pe scară largă în alocarea de agenți de infecții intestinale. Adăugarea la mediul de cultură sau verde strălucitor malachit, săruri biliare, concentrații semnificative de sare sau săruri ale acidului citric inhibă creșterea Escherichia coli și nu afectează propagarea bacteriilor patogene kishechnotifoznoy grup. Pentru a izola de spută si cultura sputei bețișoare pertussis la mediul de cultură a fost suplimentat cu antibiotic penicilină care inhibă creșterea microflorei însoțitoare și, în același timp, nu întârzie creșterea și reproducerea agentului patogen al tusei convulsive. Pentru a izola Vibrio cholerae, folosind mediul de selecție - apă peptonată, și pentru izolarea bacilul difteric - rostogoli ser de cal.

Pentru a facilita izolarea culturilor pure de anumite bacterii pot profita de faptul că ele cresc sub diferite temperaturi optima. Ca un exemplu, o metodă pentru izolarea unei culturi pure de Escherichia coli din apă prin culturile în creștere într-un termostat la 43 °, agentul cauzator de izolare plagă a materialului contaminat prin cultivarea la 20 ° C și chiar la 5 °.
În final, trebuie subliniat faptul că dezvoltarea anumitor bacterii patogene (Streptococcus pneumoniae, antrax, bacteria tularemia și colab.) Pot fi obținute în cultură pură, infectarea animalelor de laborator susceptibili sau altor microbi. De exemplu, pentru a evidenția cultura pneumococ de omul bolnav sputei a produs infectarea șoarecilor albi.

termostat

Fig. 38. Termostate.

medie însămânțat a fost plasat într-un cuptor unde temperatura este cea mai favorabilă pentru microbi în creștere. Pentru bacteriile patogene, această temperatură trebuie să corespundă cu temperatura corpului uman, adică. E. 37 °. Cuptor electric cu control automat al temperaturii sunt razmerov- diferite de mărimea unei cutii mici la valoarea camerei. Termostat pentru munca de rutina bacteriologic este un dulap cu un metal cu pereți dubli sau lemn, piele exterior conductoarele slabe de căldură, cum ar fi pluta, azbest și așa mai departe. N. (Fig. 38). Termostatul are o ușă dublă, un exterior invelite cu un strat izolator, și un cadru interior cu un pahar. Termostat dispuse în interiorul rafturile o plasă metalică.

Video: Însămânțarea de microorganisme și apă 1 lecție de la casa de biologie