Diagnosticul de toxoplasmoza

Pentru diagnosticul T. Toxoplasmoza gondii necesară selectarea din sânge sau alte fluide biologice sau tachizoite identificate în secrețiile sau specimenele de țesuturi și fluide corporale, chisturi - in placenta sau tesuturi ale fatului sau nou-născutului, precum histologic modificări caracteristice ganglionilor limfatici. De asemenea, studiile serologice informative.

Metodele culturale și microscopice de diagnostic toxoplasmozei

Biofluidelor, leucocite sau biopsii introduse in cultura de celule, fie șoarecii infectați cu ei. Biofluidelor trebuie prelucrate și administrat imediat la un animal, cu toate că T. gondii a fost izolat din țesuturi și sânge, care au fost depozitate la 4 ° C peste noapte. Congelarea sau fumigare ucide T. gondii. Mouse-ul fluid peritoneal a fost testat pentru tachizoite după 6-10 zile de la infectare, sau mai devreme, dacă animalul a murit. Dacă mouse-ul este încă în viață 6 săptămâni și sânge a descoperit anticorpi a fost examinat în chisturile creier de șoarece. Dacă sunt descoperite chisturi, tesutul de soareci injectat soareci alte.

La începutul studiului, cultura de celule microscopice, care a fost introdus T. gondii, găsit celulele moarte și vii, precum și multe tachizoite extracelulare. Izolarea Toxoplasma din sânge sau alte dovezi biolichid de infecție acută. Izolarea mușchilor Toxoplasma striat, tesutul pulmonar, creier, ochi (obținute la autopsie sau in vivo) a fătului și nou-născutului nu sunt, de obicei este posibil să se distingă de boli acute transferate.

Diagnosticul infectiei acute poate fi furnizat de prezența tachizoite în specimenele de biopsie, aspirate de măduvă osoasă sau fluidele biologice, cum ar fi LCR, sau lichidul amniotic. In preparatele convenționale tachizoite sunt de obicei dificil de detectat, atât de des este necesar imunofluorescenta sau colorare cu imunoperoxidază. chisturi Tissue confirma diagnosticul de toxoplasmoza, dar nu permit să se facă distincția acută de patologie cronică, dar prezența unor chisturi multiple dovezi ale infecției acute recente. Chisturile în țesuturile placenta sau a nou-născutului confirma diagnosticul toxoplasmozei congenitale. Caracteristica imagine histologic foarte specifice pentru limfadenitå toxoplasmă.

Serologic tehnici toxoplasmoza diagnosticare

Pentru a confirma diagnosticul de toxoplasmoza congenitală sau dobândită acută pot necesita o serie de tehnici serologice. În fiecare laborator, care este angajată în testele serologice trebuie să fie confirmat de rezultatele studiilor sale care diagnosticate o infecție în anumite condiții clinice, precum și pentru a asigura un control adecvat al calității înainte de începerea tratamentului. Rezultatele testelor serologice care sunt utilizate ca bază pentru tratament, trebuie să fie susținută de un laborator specializat.

Reaction Sabin-Feldma nachuvstvitelna spetsifichna- anticorpi în ea și avantajos IgG determinate. Rezultatele trebuie exprimate în UI / ml, pe baza pregătirilor internaționale standard furnizate de OMS.

Metoda imunofluorescență indirectă pentru detectarea anticorpilor IgG sunt aceleași ca și reacția Sebino-Feldman, titluri în ambele reacții paralele. Acești anticorpi apar de obicei după 1-2 săptămâni. după infectare, după 6-8 săptămâni. ajunge la un titru ridicat (>1: 1000), și apoi redus în cursul lunii. titruri scăzute (1: 4-1: 64) este stocată, de obicei de viață. titrul de anticorpi corespunde severitatea bolii. Aproximativ 50% din kituri pentru detectarea anticorpilor la T. gondii prin imunofluorescență indirectă standardizate în mod corespunzător și poate furniza un număr semnificativ de rezultate fals pozitive și fals negative.

Kit-ul de aglutinare (Bio-Mérieux, Lyon, Franța), vândute în Europa, pentru detectarea anticorpilor IgM utilizați paraziți întregi, conservate cu formol. Acest test este corectă, ușor de utilizat și ieftin.

Metoda de imunofluorescență indirectă cu IgM informativ în diagnosticul toxoplasmozei acute la copii mai mari, deoarece anticorpii IgM apar mai devreme (de multe ori a 5-a zi de la începutul infecției) și dispar mai repede decât anticorpii IgG. Majoritatea titrul de anticorpi determinate prin această metodă sunt în creștere rapidă (de la 1:50 până la 1: 1000), și un picături câteva săptămâni (1:10 sau 1:20) sau reacție devine negativ. Cu toate acestea, la unii pacienți titruri scăzute persistă până la câțiva ani. În toxoplasmoza congenitala metoda imunofluorescență indirectă detectează anticorpi IgM la nastere, doar aproximativ 25% dintre copii. Anticorpii IgM sunt adesea absente în ser în timpul toxoplasmoza acuta din cauza deficienței imune, în plus, acești anticorpi nu sunt prezente în majoritatea pacienților cu toxoplasmoza activă, a lovit doar ochii.

ELISA cu metoda „sandwich dublu“ - metodă mai sensibilă și specifică pentru detectarea anticorpilor IgM decât metoda imunofluorescență indirectă. La copiii mai mari, nivelul de anticorpi împotriva T. gondii 2 sau mai mult (o măsură a unuia dintre specializate laboratoriy- fiecare laborator ar trebui să stabilească propriile sale de referință) sunt susceptibile de a arata o infectie recenta. ELISAna IgM detectează aproximativ 75% dintre copiii cu toxoplasmoza congenitala. ELISA, spre deosebire de imunofluorescenta metoda nu da rezultate fals pozitive la pacientii cu factor reumatoid, precum și rezultate fals negative prin titruri mari de anticorpi IgG materne în ser. Rezultatele obținute prin utilizarea kit-uri disponibile comercial, trebuie interpretate cu precauție, din cauza ratei ridicate de rezultate fals negative. Ar trebui de asemenea să se asigure că setul activ este standardizat pentru utilizarea în anumite condiții clinice (de exemplu, la nou-născuți). In toxoplasmoza congenitală la făt și nou-născut, precum și toxoplasmoză acută în ELISA gravide pentru IgA este mai sensibilă decât ELISA pentru IgM.

In metoda aglutinare immunosorbentafiksatsiya IgM pacient la suprafața solidă este combinată cu utilizarea de formalină fixe T. gondii sau particule de latex acoperite cu antigen. Rezultatul este citit ca și în reacția de aglutinare. aglutinare imunoabsorbant nu dă rezultate fals pozitive și anticorpi antinucleari. Anticorpii la T. gondii IgM sunt detectate prin imunofluorescență mai repede decât ELISA. aglutinare imunoabsorbție metoda ELISA este superioară în sensibilitate și poate detecta anticorpi IgM IgM mai devreme și pentru o perioadă mai lungă decât ELISA. În prezent, metoda de determinare a IgM aglutinare imunosorbentul - cel mai bun mod de a diagnostica toxoplasmoza congenitală. In toxoplasmoza congenitală, toxoplasmoza acută dobândită și definiția informativă anticorpilor IgE prin ELISA sau metoda aglutinare immunosorbent.

Video: Diagnosticul de pisici toxoplasmoza

In metoda de titruri de aglutinare diferențiale ale anticorpilor împotriva tachizoite fixate cu formalină (antigenul HS), în comparație cu titrurile de anticorpi contra tachizoite, fixate cu acetonă sau metanol (antigen AU) - aceasta permite să se facă distincția între infecție recentă și de lungă durată la adulți și la copii mai mari. Această metodă este deosebit de potrivit pentru confirmarea toxoplasmoza miocardic recent la femeile gravide, deoarece titrurile de anticorpi IgM și IgA, determinate prin ELISA și aglutinare imunosorbție, zdrobitoare rămâne ridicată pentru o perioadă lungă de timp (la adulți și copii mai mari - până la câțiva ani).

Pentru a dovedi că infecția acută a început nu mai mult de 12-16 săptămâni. Acum, testul utilizat pentru aviditate (aviditate ridicată indică perioada menționată mai sus).

Video: Toxoplasmoza Tratamentul

In anticorpii hemaglutinare indirecte T. gondii, caracterizată prin imunofluorescență și detectată prin reacția Sabin-Feldman. Acești anticorpi pot persista de ani de zile. Cu toate acestea, reacția de hemaglutinare indirectă nu trebuie utilizat la sugarii cu toxoplasmoza congenitală suspectate de screening si femei pentru toxoplasmoza dobândite în timpul sarcinii, deoarece stadiile timpurii ale reacției pot rămâne mult timp negativă.

Anticorpii relativ mari de anticorpi fata de T. gondii în umoarea apoasă sau LCR indică formarea locală de anticorpi în timpul ochilor toxoplasmoza activi sau SNC.

antigen T. gondii este detectată numai în timpul unei toksoplazmoza- acute în serul sănătos și bolnav cronic nu este. Antigenul a fost prezent în serul, lichidul amniotic și numărul LCR mic de sugari cu toxoplasmoza congenitală.

infecție congenitală poate fi diagnosticată prin intermediul unei seruri comparative imunoblotare de Vest a mamei și a copilului. Dacă serul mamei și serul copilului conține anticorpi care reacționează cu antigene diferite de T. gondii, sugerând toxoplasmoza congenitală.

Analiza Immunofiltratsiony care utilizează membrane cu micropori poate examina simultan specificitatea anticorpilor prin isotypes imunoprecipitare și anticorpi caracterizate prin anticorpul imunofiltrare marcat cu o enzimă. Această metodă poate detecta 85% din cazurile de toxoplasmoza congenitală, în primele zile de viață. Studiul acestei metode merge mai departe.

PCR este utilizat pentru a amplifica ADN-ul lui T. gondii, care este apoi detectată folosind sonde ADN. Determinarea lichidul amniotic genei recurent T. gondii - B1 este cea mai bună metodă pentru diagnosticul toxoplasmozei congenitale la fat. Sensibilitatea și specificitatea acestei metode în analiza lichidului amniotic obținut la 18 săptămâni de sarcină sau mai târziu, constituie circa 95%. Pentru diagnosticul de ochi toxoplasmozei sub fluid vitros variat PCR.

Reacția transformării blastice a limfocitelor ca răspuns la antigeni T. gondii utilizate pentru diagnosticul toxoplasmozei congenitale în cazurile în care alte metode de investigare au fost negative, dar suspiciunea persistat toxoplasmoză. Dar un rezultat negativ nu exclude toxoplasmoza, deoarece mulți copii infectați nu reacționează la antigene de T. gondii.

toxoplasmoza dobândită

Video: Diagnosticul prenatal, toxoplasmoza

Dovezi ale infectiei recente sunt seroconversia (apariția anticorpilor IgG), administrarea anticorpilor dacă este posibil la secvențială perelivanii- (două tuburi) creșterea titrului de anticorpi la clasa T. gondii IgG dacă ser au fost luate la intervale de 3 săptămâni. și paralele-a investigat prezența anticorpilor la clasa T. gondii IgM.

ochi toxoplasmoza

Pacienții cu activ corioretinită toxoplasmoză anticorpi IgG Titrul este de obicei de la 1: 4 până la 1:64. diagnostic corect este probabil ca în cazul în care deteriorarea retinei caracteristice, precum și rezultatele testelor serologice sunt pozitive. Pentru diagnosticul toxoplasmozei aplicat ochi PCR fluid vitros, cu toate acestea, această metodă este rar utilizată, din cauza riscurilor asociate cu randamentul materialului.

Toxoplasmoza în tulburările de fond de imunitate

La acești pacienți, IgG titru de anticorpi poate fi redus, iar anticorpii IgM sunt adesea lipsesc. Diagnosticul toxoplasmozei diseminate ajută la detectarea antigenelor T. gondii în ser și LCR.

La pacienții cu SIDA diagnostician important este de a rezolva leziuni ale sistemului nervos central, în timpul tratamentului cu pirimetamină și sulfadiazonom ex juvantibus. In absenta răspunsului la tratament ex juvantibus, și pentru a preveni alte afectiuni aplicate biopsie creier.

toxoplasmoza congenitală

Pentru diagnosticul prenatal de ultrasunete fetale este aplicat, care se repetă la fiecare 2 săptămâni., Și PCR cu lichid amniotic. In plus, T. gondii poate fi izolat din placenta.

În Toxoplasmoza congenitala metode de diagnostic cele mai bune serologice. Pentru diagnostic trebuie să mențină sau să crească titrului Sabin-Feldman reacție, tehnica anticorpilor fluorescenți sau detectarea IgM prin ELISA sau imunosorbent aglutinare. IgM timpul de înjumătățire este de 3-5 zile, de aceea, în cazul în penetrarea anticorpilor prin placentă, nivelul lor în serul sanguin al copilului a redus semnificativ timp de 1-2 săptămâni. Dobândite anticorpi IgG Pasiv dispar la câteva luni sau un an, în funcție de mărimea titlului original. Sinteza anticorpilor la T. gondii devine, de obicei, un indicator al 3-lea lună de viață, în cazul în care copilul nu primește tratament. La copii netratați de sinteză poate fi întârziată cu până la vârsta de 9 luni, sau, ocazional, nu poate fi. Când un copil începe sinteza de anticorpi specifici, toxoplasmoza pot fi confirmate serologic, chiar și fără detectarea anticorpilor IgM. Diagnosticul de titru raportul de creștere a anticorpilor specifici IgG- total, dacă acest raport scade, înseamnă că anticorpii specifici au fost părinte.

Dacă la naștere, este suspectat toxoplasmoza congenitală, este necesar să se efectueze fizice obsledovanie- oftalmologică și neurologice golovy- CT de cercetare este de a încerca să izoleze T. gondii din placentă și leucocitele pentru copii (cu ajutorul sângelui din cordonul ombilical și leukoconcentrate) - pentru a determina titrul de anticorpi la clase T. gondii IgG, IgM, IgA și IgE în ser krovi- determina cantitatea totală de IgG și IgM în syvorotke- efectua puncții lombare cu determinarea numărului de celule în LCR, glucoza, proteine, anticorpi la clasele T. gondii IgG și IgM și totalul IgG- issled gena CSF Vat pentru T. gondii prin PCR și de a efectua o probă biologică cu CSF la șoareci. Prezența anticorpilor în LCR la clasa T. gondii IgG (dacă LCR nu este contaminat cu sânge) sau producția locală de anticorpi din anticorpii CSF la clasa de T. gondii IgG confirma diagnosticul toxoplasmozei congenitale.

diagnostic diferențial. Simptomele sunt similare cu simptomele toxoplasmozei congenitale, sunt comune multor boli ale perioadei perinatale, în special infecția cu CMV congenital. Nici calcificări intracraniene, corioretinita sau nu sunt patognomonice. Criterii serologice pentru toxoplasmoza congenitala sunt mai mici de 50% din copiii cu corioretinita la 5 ani- cauzele cele mai multe cazuri rămase sunt necunoscute. Tabloul clinic al nou-născutului poate corespunde sepsisul, meningita seroasă, sifilis sau boala hemolitica.